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bFGF的问题 [复制链接]

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包包
2011  
楼主
发表于 2012-1-7 23:48 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
求教:  ^* Z, O# y# @: B* l; r
invitrogen的bFGF可否用invitrogen的D/F12培养基来配置。稀释后,分装冻存。
7 t: P. \5 d& O4 h, w6 O0 Y(10μg的,其实也配不了几瓶medium...)
4 }  I( S/ ~" ?* A4 f$ `
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沙发
发表于 2012-1-7 23:53 |只看该作者
补充:3 ~" E5 c6 s3 S1 @' g$ v: d# h
配制前,室温稍甩。, w0 W, H  S6 q2 j( V( Y8 @
主要是用买来液体的medium配,比较放心。
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藤椅
发表于 2012-1-8 06:19 |只看该作者
回复 白巧克力 的帖子) E) N: Q4 V& J4 m
  Z+ a3 K+ i8 t! X8 i( o' H; D
你是用买来的粉加DMEM/F12 吗?
  f3 X. R& W9 F8 |; m# e我用的都需要加glycerol、BSA、DDT 和PBS配好后分装存在-20C.
9 D) g3 s. ]' B+ t) Y  H' }放进DMEM/F12 我还没有见过这样做的--也许吧。建议你bFGF用新鲜的最好。
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金话筒 优秀版主

板凳
发表于 2012-1-8 09:38 |只看该作者
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回复 白巧克力 的帖子
  J3 |7 h4 k1 t
. S! ^, t/ k6 ]% `2 u% T; K" K# y我们是用10%的BSA来配置的 ,分装后,-20保存。
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报纸
发表于 2012-1-8 12:00 |只看该作者
回复 dianying 的帖子
7 U. Z% _. P3 Q9 d
; Z/ E/ d+ |) @% U) {- @! d- U: f. N不是powder,是liquid的DMEM/F12,就是为了不用过滤啊!
$ m, H1 `4 Y. N! ^1 `  V9 c是的,我想加了后就分装冻了啊,然后就是用一支取一支啊
; g9 t* u7 f- V% m/ _2 I只是不知道用DMEM/F12会不会影响bFGF。
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地板
发表于 2012-1-8 13:48 |只看该作者
PBS with 10%BSA 来配置的,分装后,-80 or -20保存,注意分装的浓度不要太低。
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发表于 2012-1-9 09:39 |只看该作者
回复 白巧克力 的帖子' S# e  m- H" z! e; C

5 u; Q9 X! _5 ?2 H我通常配置到 100ng/uL. P  n) ]2 ~% Y2 R1 v! o% n
加50% glycerol, 25% BSA, DDT 和 pbs 之后分装到1.8的小管里存-20c几个月都没问题的。如果你把它保存在DMEM/F12中会很麻烦,DMEM/F12通常应该保存在4c。如果硬放在-20c的话,你每次用还得化冻,每次用的量也不一定相同,bFGF是不应该反复化冻的。
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专家 优秀会员 金话筒

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发表于 2012-1-9 10:12 |只看该作者
回复 白巧克力 的帖子; M) x) i  L7 ?7 V

0 Y0 a) s  f. H! K8 I  u各个公司的bFGF应该配置方法不太一样。因为购置的bFGF里面有不同的添加剂。. h1 z) t# [# q$ x& R
比如盐分,BSA等等。 所以根据你购置产品推荐, 如果用水溶或者PBS缓冲液溶,你可以用培养基替代。
2 d) [$ ^4 b: t3 a* @4 U
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优秀版主 金话筒 优秀会员

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发表于 2012-1-19 23:17 |只看该作者
我用Tris-HCL配的
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发表于 2012-1-20 00:45 |只看该作者
不是吧,应该是有专门的配置液,然后再加入到medium中,不然怎么消毒呐
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