请教一个问题 为什么基因打靶要用雄性ES细胞系

懵懂干细胞

麻烦那位高手能解释一下吗？
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% ^4 N5 _* H& {谢谢了

qq007www

还是看你打靶的基因在哪吧，但好像说雄性细胞基因稳定遗传性较好
0 p9 }9 s& w$ ^: b

concentrate123

应用雄性的比较好吧，建系成功如果想对y染色体进行基因修饰，用雌性岂不是不能处理？

usepray

长期以来做基因打靶一直接在小鼠等动物水平,而打靶效率很不一致,很少情况下能得到一个等位基因打靶的细胞系,所以通常的做法是将一个等位基因打靶的细胞系(ES)培育成小鼠,然后将其与正常(通常带有重组酶)异性交配,有1/4概率得到两个等位基因打靶的纯合子后代; 如果起始用的一个等位基因打靶的细胞系(ES)是母的,一次交配只能产生一窝;如果是公的,你想想可以多少窝,这样可以保证拿到或拿到更多纯合子,这就是germline transmission.
3 k* q* B) D: i( ?但是随着打靶技术的发展,在人等高等动物细胞水平也可以实现打靶后, 伦理上你不能培养克隆人,不存在利用germline transmission产生纯合子的可能性;所以用XY的XX的(如果不存在什么易于同源重组的说法,这个还真不了解)都一样了,可以看到文献中有用H1也有用H9或其它人的ES细胞系.

细胞海洋

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colindream

回复 cicadacjk 的帖子
1 t0 z) Z0 y! r4 J1 d1 I. {
* j+ N0 e; A; b& l$ P: |* @/ A  y刚开始接触 干细胞，对 germline transmission 实在是不太理解。 $ v$ k: b+ u$ b8 a0 b6 K) j0 Q" T5 D
我现在刚开始做 gene targetting,,现在筛选 ES 阳性克隆。6 w! W" }7 ~/ s5 Z2 {
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germline transmission 的理解，实在是没有概念，。，。& f' q" w% d/ [8 l: n8 K& l
望大侠 指教！！！

colindream

刚开始接触 干细胞，对 germline transmission 实在是不太理解。
! K6 P1 h0 K$ g+ }) U' F我现在刚开始做 gene targetting,,现在筛选 ES 阳性克隆。
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5 H) h+ j# N" M. w0 ?germline transmission 的理解，实在是没有概念，。，。
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qizhi502

因为那个时代转基因动物的出生所使用的是嵌合的办法，嵌合动物的出生雄性概率和存活率都很高，但是克隆和四倍体嵌合技术较为完善的话，也可用xx的细胞系

wlj0912

回复 懵懂干细胞 的帖子$ Q2 w# J) Y. A

$ Z6 r6 h0 T% {% K5 ?$ z1 k雄性的小鼠一旦出现嵌合鼠了，可以和很多母鼠交配，F1代比较容易出现

cicadacjk

这个太容易解释了，你自己想象一下操作过程就知道' K% r- G5 r6 o& _7 k
敲除的限制步骤是germline transmission
$ y. _% H- \% }说到底，这就是茶壶和茶杯的关系