请教一个问题 为什么基因打靶要用雄性ES细胞系

懵懂干细胞

麻烦那位高手能解释一下吗？  L4 \0 L; i0 |+ ?! @& f' O

- k1 ~# G+ n  f) A6 [- r2 ~: m. a) Y谢谢了

qq007www

还是看你打靶的基因在哪吧，但好像说雄性细胞基因稳定遗传性较好; y% G3 \/ B+ H  t+ B8 c

concentrate123

应用雄性的比较好吧，建系成功如果想对y染色体进行基因修饰，用雌性岂不是不能处理？

usepray

长期以来做基因打靶一直接在小鼠等动物水平,而打靶效率很不一致,很少情况下能得到一个等位基因打靶的细胞系,所以通常的做法是将一个等位基因打靶的细胞系(ES)培育成小鼠,然后将其与正常(通常带有重组酶)异性交配,有1/4概率得到两个等位基因打靶的纯合子后代; 如果起始用的一个等位基因打靶的细胞系(ES)是母的,一次交配只能产生一窝;如果是公的,你想想可以多少窝,这样可以保证拿到或拿到更多纯合子,这就是germline transmission.. C, L' [* R/ ?* g( F/ C- W
但是随着打靶技术的发展,在人等高等动物细胞水平也可以实现打靶后, 伦理上你不能培养克隆人,不存在利用germline transmission产生纯合子的可能性;所以用XY的XX的(如果不存在什么易于同源重组的说法,这个还真不了解)都一样了,可以看到文献中有用H1也有用H9或其它人的ES细胞系.

细胞海洋

回复 colindream 的帖子3 [0 ^8 i8 l; D
, }7 m1 X8 |; K& T, C
建议你发新帖提问

colindream

回复 cicadacjk 的帖子
. f! a+ Z$ J' \0 T& O
+ {: w1 a) L( o8 o刚开始接触 干细胞，对 germline transmission 实在是不太理解。
% i3 d  \# }; f. V我现在刚开始做 gene targetting,,现在筛选 ES 阳性克隆。
! U* R7 P9 |  R2 A/ L; @9 M. j  _0 M- e- m- d9 Q2 w; t
germline transmission 的理解，实在是没有概念，。，。, J+ R: q4 P. ^; V0 z
望大侠 指教！！！

colindream

刚开始接触 干细胞，对 germline transmission 实在是不太理解。 # \# O7 f+ C$ q
我现在刚开始做 gene targetting,,现在筛选 ES 阳性克隆。' |7 j/ e6 v# U" V) i  R9 ^/ k
; a& n: n! W  O4 V9 y3 r' [
germline transmission 的理解，实在是没有概念，。，。3 X" u" E) A& B$ C  E$ k
望大侠 指教！！！

qizhi502

因为那个时代转基因动物的出生所使用的是嵌合的办法，嵌合动物的出生雄性概率和存活率都很高，但是克隆和四倍体嵌合技术较为完善的话，也可用xx的细胞系

wlj0912

回复 懵懂干细胞 的帖子  ^- D6 q6 O' d& o, G, q; I
- @1 w: ?$ ]7 M' D3 {
雄性的小鼠一旦出现嵌合鼠了，可以和很多母鼠交配，F1代比较容易出现

cicadacjk

这个太容易解释了，你自己想象一下操作过程就知道& T& x8 L! x1 W, t& v
敲除的限制步骤是germline transmission
5 ]/ U8 |  i; D说到底，这就是茶壶和茶杯的关系