今天丝裂霉素处理MEF出现了问题，谁能告诉我啊

chenchunlei

    丝裂霉素处理MEF2.5小时候，用PBS洗了5遍后加了1.5ml胰酶消化液，但消化下来的细胞成胶冻样，怎么回事？之前没有过啊
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184lj

0.05% T/E溶液，3min就可以了，浓度不用太大。

shangchunhua

回复 chenchunlei 的帖子7 i! i% w, N! W7 H7 _
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我都是用预热的PBS洗MEF的，效果很好！我以前也用用过不预热的，发现细胞很容易被洗的脱落下来，获得的细胞量少。建议楼主还是预热吧，洗的时候也轻一些，不要对着细胞。

chenchunlei

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我们从来不预热啊

scienese

楼主这样的问题我也遇到过，就是一些酶联反应造成的，你那枪头往细胞表面一粘，都能扯出丝来，很好玩的呵呵。。。这种情况我就放弃了，细胞是很难消化下来的，及时消化下来它也不长!

前途似锦

回复 抹了个茶 的帖子6 d& P; [2 e5 P8 ]3 }

1 o9 j2 j4 g5 O这。。。。。。。。不要误导小朋友啊，呵呵

chenchunlei

操作版本怎么这么多啊

shangchunhua

回复 chenchunlei 的帖子( R2 Y% J3 x, s7 @$ Y

" P' U) x! w% d* a3 }PBS是预热的吗？

YYQ6301

丝裂霉素的浓度没有弄错吧？应该是消化过度了

myrudy

回复 momocy 的帖子0 ]  ]# x3 ~# \2 D4 O
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洗一遍的话，丝裂霉素的残留量会较多，对细胞伤害较大。