错在哪一步，望赐教！------谈脐血分离MSC

542177563

具体步骤是：脐血稀释---红细胞裂解液裂解稀释后的脐血---取上清液-----再用密度梯度离心----吸取白膜层（白膜层不是很明显）---PBS洗两便---一部分养在DMEM中想得到MSC，另一部分养在EGM中为了得到EPC（用的是培养瓶，没有铺胶）------可三天后换液（换液时没有发现贴壁的细胞）------换液2天后发现瓶中仍没有贴壁的细胞。结果什么也没培养出来，步骤中哪一步错了，望赐教！

sdwzg119

要说脐血MSC的话，一般是不会每份都能养出MSC的，不过我是听说~没自己养过~据说挺难养~

壹DD

1.试剂问题，
0 x3 ]  S; C8 `" R8 j! y2.方法技术问题。
# `  x6 K- h# m试问你的细胞敢用临床吗？, j* H/ q' I$ |/ a' e  s* x# x

+ p0 g# V1 V' [/ z- x

Roden

脐血稀释---红细胞裂解液裂解稀释后的脐血---取上清液-----再用密度梯度离心----吸取白膜层（白膜层不是很明显）---PBS洗两便---
% ?& d* D$ a0 y5 p. p; ?6 x楼主详细解释下这两步吧？为什么不直接密度梯度离心？

camus

跟楼上有同样的疑问

nankou2008

做过脐带间充质 组织块贴壁慢慢就爬出来了
" u/ ]6 C8 S6 ?  g  M+ x8 j脐带血干细胞也贴壁吗？

meister

回复 542177563 的帖子, G, z' i3 o* r5 X

9 p( t& ?# |; V$ m) d是ＭＳＣ，EPC都没有吗？

camus

脐血间充质干细胞难道不贴壁吗请问？

hybaoyu

困难重重

542177563

回复 Roden 的帖子% O# f( S3 g" ^& }

0 S  V: d4 m( e4 T这周二又做了一次，干脆把脐血稀释之后直接密度梯度离心，而且离心后也见到白膜层了，但今天还是没有见到贴壁细胞。