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楼主: l19rna
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[请教] 荧光原位杂交(fish)探针设计原则和方法     [复制链接]

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发表于 2013-8-7 07:47 |只看该作者
回复 icebaby 的帖子
$ b& v  L$ d( ^. @9 t
' ^% ?. H, V2 TFISH已经有很多更高效的方法。尤其是做单细胞且定量的FISH。其探针也有很多种,除了传统的,还有50bp长度,19-24bp长度探针,等等
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发表于 2013-8-7 07:43 |只看该作者
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! f/ G! P' c4 G' H  u
: B# K# K1 s0 L3 C0 Q我一般是用别人已经发表的探针,而且其表达谱是公认的,才用来做阳性对照;
0 n2 |. Z$ N1 b阴性对照就选择cRNA的互补序列,这个在你的cRNA载体上转录出来就行。
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发表于 2013-8-6 23:47 |只看该作者
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4 p$ U; Q4 q* o$ U+ v7 J- n9 `2 B
4 Q0 I/ [0 n5 z) P& m建议你发新帖提问

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发表于 2013-8-6 14:21 |只看该作者
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我想请教一下想做一个对照内参探针找什么基因比较好 本人刚接触ish
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发表于 2013-8-6 00:58 |只看该作者
做ISH,最常用的还是Riboprobe吧?我想FISH也应该是这样的。我最近要做ISH,探针的话想找个公司来做。
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发表于 2013-6-26 15:03 |只看该作者
想了解

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发表于 2013-6-26 15:02 |只看该作者

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发表于 2013-1-18 20:40 |只看该作者
回复 hn1022 的帖子
) `/ y5 `5 @! m- G, V- \5 v/ o# L/ c' j( V5 T: C) u7 Q7 t
不同天数的胚胎的ptotocol会有细节上的差别,我做的比较早期,建议参考nature protocol上的文章: * d1 f( k) L3 n# i2 d3 @! f, S
Title:An optimized procedure for whole-mount in situ hybridization on mouse embryos and embryoid bodies
2 T7 {3 |6 h4 Z5 Y7 U! `# H
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发表于 2013-1-18 16:06 |只看该作者
我也要做胚胎的RNA FISH ,想请教一下protocol呀!谢谢

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发表于 2013-1-12 12:41 |只看该作者
谢谢大家,这两天忙考试了,没上网,非常感谢
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