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楼主: l19rna
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[请教] 荧光原位杂交(fish)探针设计原则和方法     [复制链接]

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30楼
发表于 2013-8-7 07:47 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
回复 icebaby 的帖子
5 c3 `4 D6 n) L. a+ v
, {+ k2 l% c% I9 nFISH已经有很多更高效的方法。尤其是做单细胞且定量的FISH。其探针也有很多种,除了传统的,还有50bp长度,19-24bp长度探针,等等
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29楼
发表于 2013-8-7 07:43 |只看该作者
回复 doctorrobin 的帖子
$ K( Q5 c; w- ~" j
6 a/ D5 {+ E6 s% K" K8 d我一般是用别人已经发表的探针,而且其表达谱是公认的,才用来做阳性对照;8 x/ _* n: F) T# |
阴性对照就选择cRNA的互补序列,这个在你的cRNA载体上转录出来就行。
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28楼
发表于 2013-8-6 23:47 |只看该作者
回复 doctorrobin 的帖子# f6 T. {; \. u4 W0 ~. K

  j  M6 n- K7 V9 U' K建议你发新帖提问

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27楼
发表于 2013-8-6 14:21 |只看该作者
我想请教一下想做一个对照内参探针找什么基因比较好 本人刚接触ish
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26楼
发表于 2013-8-6 00:58 |只看该作者
做ISH,最常用的还是Riboprobe吧?我想FISH也应该是这样的。我最近要做ISH,探针的话想找个公司来做。
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25楼
发表于 2013-6-26 15:03 |只看该作者
想了解

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24楼
发表于 2013-6-26 15:02 |只看该作者

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23楼
发表于 2013-1-18 20:40 |只看该作者
回复 hn1022 的帖子
; t+ ~2 g5 H9 @' B8 U0 q: I. i# K4 D( q2 R
不同天数的胚胎的ptotocol会有细节上的差别,我做的比较早期,建议参考nature protocol上的文章:
' m3 T: D5 f; X7 j; qTitle:An optimized procedure for whole-mount in situ hybridization on mouse embryos and embryoid bodies
6 o' e8 T( l/ T
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22楼
发表于 2013-1-18 16:06 |只看该作者
我也要做胚胎的RNA FISH ,想请教一下protocol呀!谢谢

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21楼
发表于 2013-1-12 12:41 |只看该作者
谢谢大家,这两天忙考试了,没上网,非常感谢
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