荧光原位杂交（fish）探针设计原则和方法

xxp1246087085

谢谢大家，这两天忙考试了，没上网，非常感谢

l19rna

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# d7 n+ k9 h! j# H) I0 C6 Y0 f4 {* X. w
嗯嗯，非常感谢分享经验

flybear

做这种fish，先弄最好做的，比如actin等，做个阳性对照了！！！出来了，再做目的基因的！！！！

flybear

FISH要求的长度是1000-1200bp左右吧，如果做细胞的可能要考虑你的转化效率了！！！片段太短，特异性很差，这个楼主要考虑了！！！

l19rna

回复 xxp1246087085 的帖子, ?+ r  L1 U) `. ]1 F2 h$ p& R  s
) ^4 `2 r+ \! p7 Z
木有影响，放心吧。你做体外转录时候还有载体上的一小部分序列呢，不会影响结果的

xxp1246087085

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5 H% {4 L8 k: F7 F# }* G/ q) `$ s, a2 A
我现在设计的500bp长度的探针，末端会有1-2bp的不匹配序列，不知道对结果有影响没有，我用的RNA探针

l19rna

回复 xxp1246087085 的帖子- ]9 [. X2 I9 R

7 I' ]6 e& W1 x) ?; X) v我现在只会做whole mount ISH of mouse embryo，不知道能不能帮到你了，呵呵

xxp1246087085

回复 l19rna 的帖子, m3 F. G3 o, d, I2 K; O

- E1 l0 h4 T* o* E9 u2 z% E8 O以后还要多多请教啊

l19rna

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1 k# S4 v5 p) Y/ e+ L( _! l) Q1 I# z$ N' Z, l( Z0 \
兄弟加油，我已经搞定了

xxp1246087085

准备做RNA FISH，白手起家啊