再发图！用Ficoll分离脐血后的效果（15ml和50ml离心管）

huajie881026

前不久，做脐血MSC分离，用50ml离心管分离后，白膜层不清晰，故发了一帖http://www.stemcell8.cn/thread-58525-1-1.html. m8 G- l) Z7 K  ~- _1 Z
昨日又做了一次，分别用50ml和15ml离心管都做了，还是按Ficoll说明书来，500g  20℃  30分钟，结果50ml管还是“白雾”层，15ml就是大家所谓的“白膜”层（下图），可见是离心管的不同导致了分离后分层的区别。+ {6 L/ |# I0 V) \
可问题又来了，我100ml脐血，用100mlPBS稀释，再用100mlFicoll分离，这得要20个15ml离心管来分离啊，这得多浪费啊。不管怎么样，我还是用50ml的离心管先做了，我相信能得到MSC！！！
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帝国黑骑士

回复 huajie881026 的帖子% F& c+ u' h6 Z  v$ W! w- F
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我觉的 用50ml 的离心管离心是的离心力可以再大一点，可能会好一些！比如700g ！个人觉得。

lm310389487

经验：离心力稍微调大些效果更好，大概就700g吧

huajie881026

嗯  下次我再改进，用700g以上再试试。, p: r2 A' x$ l! |7 d6 \+ m
我一直用500g，30min，一方面是Ficoll说明书上这么说，一方面是下面一篇文献上也是这么做的
( p1 L9 P" S  u他做了四百多分脐血，最后发现＞90ml脐血和2小时内操作是成功的关键
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xuehu20

回复 huajie881026 的帖子  X' v/ F! u$ ?! ~7 I" `! x7 \, e! G
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你好，请问你说的文献有原文吗，能给我一份吗，谢谢

sdwzg119

Ficoll是国产的还是进口的？？我对比过国产淋巴细胞分离液和进口的之间的区别，进口的明显比国产的好的多！！粗略算算，大约进口的能比国产的得到多50%的细胞

huajie881026

sdwzg119 发表于 2012-8-2 14:56
* m6 a) x8 ]( r. rFicoll是国产的还是进口的？？我对比过国产淋巴细胞分离液和进口的之间的区别，进口的明显比国产的好的多！ ...

( e! J# H4 R5 w进口的，GE的，2000+才600ml，分一次要用100ml，所以分一次心疼啊

huajie881026

xuehu20 发表于 2012-8-2 14:48 3 a" q7 p& {: `' Y8 m4 S& @) J7 m$ h
回复 huajie881026 的帖子* `& l. q) f- `% q1 i3 S/ B& |9 B% O

& C. L0 q* L0 q  I  S% q9 d你好，请问你说的文献有原文吗，能给我一份吗，谢谢

. l/ @7 r- v2 D此贴可下载
1 p6 N% f* y8 t" Lhttp://www.stemcell8.cn/thread-58705-1-1.html

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学习中

透明之蓝

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huajie881026 发表于 2012-8-2 10:38 2 ]! V& J3 r6 I3 M! s6 }
前不久，做脐血MSC分离，用50ml离心管分离后，白膜层不清晰，故发了一帖http://www.stemcell8.cn/thread-58 ...

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, h& N) Z/ k2 Z& V同样的分离液，15cm的肯定分离效果更好。& ~; g( I# s8 G
肯花2000元买分离液，看来你是在搞科研，而且，脐血的MSC含量少不好养出来，综合你的情况，还是用15cm的吧！
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By the way：养出来了通知一下，呵呵，我曾养过几次，情况都不好！祝好运！