大家都是怎么消化mES的

不倒翁

最近养mES R1，看了很多protocol，都强调传代的时候一定要制备成单细胞悬液，要不然很容易分化。 我消化的时候0.05%的胰酶消化3min，一拍盘细胞全都掉下来了，然后加2倍体积的培养基终止，发现细胞吹不散，种下去还是成块的。有没有有经验的人指点一下，消化多长时间，加多少体积的培养基重悬，吹散的时候大概吹打多少下？先行谢过了~

不倒翁

回复 sciencesky1 的帖子7 A- G. d- W& V3 }& L( ?
: h. k7 U3 x' t- o, j- ]
我养在feeder上的

不倒翁

回复 sciencesky1 的帖子
1 }% _; v, n2 ]3 u8 o1 K6 F: m. ^) J# o, W0 l6 K
培养基是加lif的

不倒翁

回复 igdb 的帖子0 j: J& j1 A4 z. z( C. |' b' M

+ t, w9 g! I5 ?! V) o6 m* I就是在37°消化的 那我换胰酶试试

不倒翁

回复 生旦净末丑 的帖子
& D' S. b- l4 g3 N4 K: r& o* u9 K5 b" G" k0 d* z  C1 C
那我换胰酶试一下 你们用多大浓度的胰酶 消化几分钟

不倒翁

回复 BNJN 的帖子5 D$ h9 K! Q$ C/ ?5 o

: x5 ^/ B! c) A) ~! R( t嗯 谢谢提醒 我先换新的试一下

不倒翁

回复 BNJN 的帖子2 D! F* Y2 J( K% S, E0 z, a

  x7 @1 h6 |" \& S0.05还是0.5哦
! M( m# B# y& E( d

不倒翁

回复 BNJN 的帖子1 _" m$ I. K$ h& s$ X! B1 X

1 G/ P% V. S! N1 |嘿嘿 谢谢