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请教专家:hiPS复苏问题。   [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2012-9-11 08:00 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
我最近复苏hiPS细胞,复苏后第1天细胞克隆贴壁还很好,细胞状态也不错,而第2天细胞克隆就开始脱落。我想是不是细胞代数太多了,我的细胞传到30多代了。
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沙发
发表于 2012-9-11 11:08 |只看该作者
回复 也行天下 的帖子
- M; J- b( L; a6 ^" _' m, b
) {$ H" u* T8 W应该不是细胞代次问题。你说第一天贴壁很好,有图片吗?
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藤椅
发表于 2012-9-11 13:36 |只看该作者
无图无真相,最好传几张照片看看哦:)

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优秀会员 金话筒

板凳
发表于 2012-9-11 21:53 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
hiPS细胞复苏很不容易,第一天看上去有克隆,其实肯定活性不是很好了,复苏过程中要加ROCK inhibitor,这个很重要!
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报纸
发表于 2012-9-12 07:51 |只看该作者
回复 小禾禾 的帖子
2 n/ m. K  D6 g4 K/ a- x# _/ n4 j+ X. P  D( \

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地板
发表于 2012-9-12 08:07 |只看该作者
回复 frankieisme 的帖子
1 I/ B; h$ ?# J& u" E7 @" g$ N
) J7 J* t5 O/ G4 x7 r, y1 R我复苏后是feeder-free培养的,在Matrigel包板时和培养液中都加Y27632了,我同时复苏了两管细胞,一管P27代的,一管P32代的,用的培养基是同一管里的mTeSR1。复苏转天两管细胞贴壁都挺好的,复苏后第2天再看,P32代的细胞就有好多漂起来,P27代的没有。复苏后3天P32代细胞几乎就没有贴壁的了。现在P27代的已经传了一次代了,生长也挺好的。
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小小研究员

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发表于 2012-9-12 08:13 |只看该作者
回复 也行天下 的帖子, j8 D' [% k4 l& W
+ A, A, j' G/ q* ]) I5 r9 r& ?4 N0 x
回复 高级模式 附件上传 单个图片不要大于1000kb 可以使用qq截图

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发表于 2012-9-12 08:18 |只看该作者
回复 细胞-77 的帖子
& @+ ?9 A0 u5 h1 U' K* @! |6 h3 C* G4 Y. {4 ]9 R
我也想上传图片,但不知道怎么传,无法直接从电脑中复制到发帖中;点回帖中的图片图标要求输入的图片地址应该填什么啊?不好意思,问题很菜,望指点。

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发表于 2012-9-12 08:53 |只看该作者
回复 细胞海洋 的帖子0 E0 c" p! e' u+ t4 \+ Q: w# J) v

6 h  K6 n3 \: Q8 q" h" J8 I  `
3 O( V7 l6 w6 q; S5 C6 x, U; d- v! a  }( Z6 M+ B( y
补充内容 (2012-9-12 08:54):! u# `* E" N# Z, @4 N6 A
这是复苏后24h的照片
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发表于 2012-9-12 09:01 |只看该作者
回复 细胞海洋 的帖子) o2 I# R& S/ ]4 I& G  V8 b7 u
5 T( L* F5 s4 F4 A* a5 z
谢谢指点!
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