求助：牛与绵羊克隆过程中的融合问题

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7 ^. q3 ~8 o/ H    本人接触克隆时间不长，动物体细胞克隆过程中，卵母细胞的去核、注核及二者的电融合是整个克隆过程的关键操作，这些操作的熟练程度直接影响克隆效率。/ B$ d- W0 {/ K% U- ^* A
    经过本人多次实验操作练习，我觉得电融合这步操作是最影响效率的。平均下来，能够成功融合成胚胎的比例大约为20%-30%，约10%在电容和之后不久发生胞质萎缩死亡，剩下的大部分卵母细胞与体细胞的复合物不融合（即使相互接触的很好）。我在文献上又看到融合率能达到79%-80%的，在这里想问问各位老师我的融合率低的原因，我的实验的具体参数如下：  x8 b+ @4 @6 ^( ?
    融合仪：BTX/ E) g& G' ^& }/ U
    融合参数：1.2kv/cm   30μs/次  连续2次脉冲
' Y% i% U& U2 i. J. x! O    融合液成份：甘露醇         0.27mM
0 f1 }- q2 M. q                       CaCl2          0.1mM% [& r3 M1 J6 F3 h5 R
                       MgCl2         0.1mM( h. p; @* a, Q5 i
                       Hepes         0.5mM* b9 }9 t7 m% _/ v- C0 [' R) X3 y- s( v
                       PVA            0.01%* F9 u/ a, i' Y# I! x( C  g- l3 {- V

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