求助：牛与绵羊克隆过程中的融合问题

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    本人接触克隆时间不长，动物体细胞克隆过程中，卵母细胞的去核、注核及二者的电融合是整个克隆过程的关键操作，这些操作的熟练程度直接影响克隆效率。6 U: E2 u2 g, d# {
    经过本人多次实验操作练习，我觉得电融合这步操作是最影响效率的。平均下来，能够成功融合成胚胎的比例大约为20%-30%，约10%在电容和之后不久发生胞质萎缩死亡，剩下的大部分卵母细胞与体细胞的复合物不融合（即使相互接触的很好）。我在文献上又看到融合率能达到79%-80%的，在这里想问问各位老师我的融合率低的原因，我的实验的具体参数如下：
  f6 W. e# K% u. ~- E    融合仪：BTX: s7 p6 U$ X7 V
    融合参数：1.2kv/cm   30μs/次  连续2次脉冲
; Q; ?; \8 U$ v' S- [    融合液成份：甘露醇         0.27mM
2 a0 e+ q/ \8 @2 z! l                       CaCl2          0.1mM
6 |2 Q2 A& B4 @$ w                       MgCl2         0.1mM
. ~7 Z) A& v+ }+ D                       Hepes         0.5mM
' E- \) o; }8 S                       PVA            0.01%: u/ `! v" W; o1 m/ g) I$ `

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