求助：牛与绵羊克隆过程中的融合问题

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    本人接触克隆时间不长，动物体细胞克隆过程中，卵母细胞的去核、注核及二者的电融合是整个克隆过程的关键操作，这些操作的熟练程度直接影响克隆效率。2 s5 Q: ?1 w- J/ p
    经过本人多次实验操作练习，我觉得电融合这步操作是最影响效率的。平均下来，能够成功融合成胚胎的比例大约为20%-30%，约10%在电容和之后不久发生胞质萎缩死亡，剩下的大部分卵母细胞与体细胞的复合物不融合（即使相互接触的很好）。我在文献上又看到融合率能达到79%-80%的，在这里想问问各位老师我的融合率低的原因，我的实验的具体参数如下：, o/ Z5 `: a& t- A6 x' O) P
    融合仪：BTX$ G6 K* x, M- S9 l! i# l, Q" V
    融合参数：1.2kv/cm   30μs/次  连续2次脉冲
& u8 p5 _+ Q, X    融合液成份：甘露醇         0.27mM4 Q- T6 z4 J" F) S. a
                       CaCl2          0.1mM
$ `# K; T% T, ]0 b% v3 {                       MgCl2         0.1mM
7 l" r, S; @# E                       Hepes         0.5mM$ c8 R: b9 _  o4 e: _- ]
                       PVA            0.01%$ j9 u+ I4 P9 r+ i2 E* p
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