求助：牛与绵羊克隆过程中的融合问题

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2 g/ C" g$ Q# B! i3 h" B7 u3 K    本人接触克隆时间不长，动物体细胞克隆过程中，卵母细胞的去核、注核及二者的电融合是整个克隆过程的关键操作，这些操作的熟练程度直接影响克隆效率。& x; j8 q6 B' n: |+ ]  b2 p
    经过本人多次实验操作练习，我觉得电融合这步操作是最影响效率的。平均下来，能够成功融合成胚胎的比例大约为20%-30%，约10%在电容和之后不久发生胞质萎缩死亡，剩下的大部分卵母细胞与体细胞的复合物不融合（即使相互接触的很好）。我在文献上又看到融合率能达到79%-80%的，在这里想问问各位老师我的融合率低的原因，我的实验的具体参数如下：/ ~8 A+ i2 F) g/ e: d
    融合仪：BTX, _; \6 {3 G8 n$ O- v+ o
    融合参数：1.2kv/cm   30μs/次  连续2次脉冲5 d: x- {7 g! D% a% W
    融合液成份：甘露醇         0.27mM
2 [/ F6 y- f8 p2 r, ^0 v: N- E                       CaCl2          0.1mM
8 K/ O/ l) z9 {5 n4 |                       MgCl2         0.1mM% w/ V4 S" `2 [  \
                       Hepes         0.5mM: `1 t7 F4 q, \5 [; f8 d% R
                       PVA            0.01%1 {" I" v- q4 r0 S

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