求助：牛与绵羊克隆过程中的融合问题

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    本人接触克隆时间不长，动物体细胞克隆过程中，卵母细胞的去核、注核及二者的电融合是整个克隆过程的关键操作，这些操作的熟练程度直接影响克隆效率。  G6 z; W% l3 E5 \' j
    经过本人多次实验操作练习，我觉得电融合这步操作是最影响效率的。平均下来，能够成功融合成胚胎的比例大约为20%-30%，约10%在电容和之后不久发生胞质萎缩死亡，剩下的大部分卵母细胞与体细胞的复合物不融合（即使相互接触的很好）。我在文献上又看到融合率能达到79%-80%的，在这里想问问各位老师我的融合率低的原因，我的实验的具体参数如下：
- v4 I& i8 a4 J    融合仪：BTX5 T6 I0 Z( E( K5 j" K
    融合参数：1.2kv/cm   30μs/次  连续2次脉冲8 P' S" q  ]8 D2 A8 a% h
    融合液成份：甘露醇         0.27mM
& s5 j* z& f! M2 z8 J                       CaCl2          0.1mM
. a2 b8 [: h* D* F0 o# T$ r' Q                       MgCl2         0.1mM
* y( R+ ?' w6 j1 s                       Hepes         0.5mM1 ~$ D* u, Y* H9 H5 Q* G9 y
                       PVA            0.01%" f; n! q8 K$ l3 s! t) l4 @

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