求助：CIK细胞培养

immyouyou

我培养人外周血的CIK细胞在第5天1瓶传2瓶扩增后，集落就紧紧地贴在壁上，而且周围有很多梭形或长长的细胞，晃晃培养瓶也很难漂起来，再继续培养下去，往往集落就会越来越少，细胞变得越来越大，感觉很杂乱，请教一下，怎么回事？- m+ h( R) D8 y3 H* p- t% S2 e; z
是培养基的量多了还是少了？
6 C+ p8 x8 u- x血清浓度10%，可以吗？2 J5 e0 \+ P# z: {! z6 ^
IL-2 1500U/ML  IFN-r  1500U/ML,浓度大了还是小了？
: j; B  B7 G% z8 f, Y* V5 S/ D7 u谢谢！

kyo000

最好是上张图来看下，更好判断……
& Y& m3 Y) H4 w& \4 N1 K: D还有用的什么样的培养基，我们之前用的也是10%的血清浓度，后来换了无血清培养基，' v8 X8 Q9 C% ^  U6 t
个人感觉用无血清培养基养的细胞更好点……
- S7 H6 j9 a3 h: Q因子浓度好像大了点……1 g( B3 ^% p9 w$ ~

花饶然

我也遇到过这种情况，但是极少，那么多份外周血中就遇到过一次这样的情况，我想会不会和病人自身有关，他抽了两次血，两次的细胞都是这样的。开始悬浮细胞就比较少，一般贴着在，到第7天感觉有一部分梭形的细胞了，跟间充干一样形态。后来几乎都没什么悬浮细胞了，都贴壁了。求指教！

hwlightning

1000U

莫邪小仙

因子浓度是高了点，一般的都是用的1000u的。培养了一次外周血的 长的很不好，最后干脆都死掉了，但是没出现楼主的这种情况，只是刚开始长的很快集落也很大，后来一个周后就几乎不长了，慢慢的都死了。。。

stang198651

因子浓度是有点高了，一般1000u，再低点500u也还可以。

immyouyou

我传2张照片，大家看看，个人感觉CIK还未成熟或过成熟，细胞因子的浓度很重要

immyouyou

immyouyou

hwlightning

细胞密度也很重要，不要传的太稀。