请教关于脐血CIK细胞增殖团与CD3，CD56双阳性的问题

bloodroses

小弟刚刚接触CIK，养外周血CIK时，增殖团的数量和体积都相应增加，第7天双阳率是10%，第14天到了50%。! [# V8 k8 p6 P4 W
诱导方案是INF-γ 1000u/ml, 24小时后加CD3 50ng/ml, IL-2  300U/ml，之后2~3天半量换液，补充IL-2到300U/ml。- v% ]; f0 ]6 }; I# }9 _
培养基用国产无血清培养基。分离液是Ficoll 1.077。% O+ }- A1 T0 r& x
可是养脐血CIK时，分离方法和诱导方案以及培养基都相同。
3 e2 C4 J/ d4 m( ]+ A第3天的时候，可见少量增殖团生成，到第7天检测时，双阳率在0.5%以下，+ @' S# C$ m9 h8 V% k- H2 Q
之后培养基又用PRMI 1640+10%FBS，以及在培养基中加10%自体血浆。
6 S& P/ x" @' ~' H- |重复4次试验，都是只见增殖团，流式检测时，双阳率都在1%以下。
/ C' U( {, B" P恳请高手帮忙分析一下原因啊，谢谢。

liutianhua

回复 bloodroses 的帖子% H! f0 O  w: a& S
9 Y$ G# ?) M6 B7 ~' F% U
脐血有很多性质与外周血不同，毕竟没有经过阴性筛选和阳性筛选，其实我很怀疑外周血方案用在脐血行不行，因为我也做过，效果时好时坏。

bloodroses

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) h2 R, A$ F7 |1 @谢谢您的回复

莫邪小仙

哎，我的问题和楼主恰好相反，同样的方案用在脐带血上养的很好，而用在外周血上却是一直死亡。。。。

bloodroses

回复 莫邪小仙 的帖子7 _6 _. w7 X: s8 K" j1 p' ?! e  q6 A
- Q: t! C! |" p: i% G( Y; N
请问脐血CIK诱导方案你用的是什么啊？

莫邪小仙

回复 bloodroses 的帖子6 w* K3 x. l7 I- Q9 a% ]4 m' d, E  V
( D! y6 @4 g- b6 U
和你的方案差不多，只不过24h后除了CD3和IL-2还加了IL-1，而且IL-2的浓度是500，之后也是换液，保证换液后的浓度是1左右。就这样。用这个方案养外周血的却养不好，咱俩的问题颠倒过来了。。。血清都是用的1640+10%FBS

liutianhua

回复 莫邪小仙 的帖子* F3 t8 ~& q0 b  T. m

* Y- {% H2 o! b! d& }外周血的怎么一直死亡呢，能传个图片吗？

bloodroses

回复 莫邪小仙 的帖子- D! f8 P6 M0 @7 o1 |  _7 y9 @

9 k. |6 z: Y, t3 {8 i8 L$ \8 O我的没有加IL-1，而且IL-2的浓度也只有300U

lyd20042004

bloodroses 发表于 2013-1-15 15:45
3 I0 ?* L3 y: T# Z$ B/ F5 l小弟刚刚接触CIK，养外周血CIK时，增殖团的数量和体积都相应增加，第7天双阳率是10%，第14天到了50%。  E$ m& p* _- O6 @
诱导 ...

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双阳率第14天到了50%，请问是是平均还是个例，如果是平均是什莫牌子培养基？

bloodroses

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* T- ?, Y2 z, A. r2 I  e' P$ @: l# l6 ^9 y; I% M8 m( _; {! h" `& R
目前的数据只是个例9 ~% v3 ?. z& ~7 Y' M9 m
数据还在积累中，平均值是多少，现在还不好说