请教关于脐血CIK细胞增殖团与CD3，CD56双阳性的问题

bloodroses

小弟刚刚接触CIK，养外周血CIK时，增殖团的数量和体积都相应增加，第7天双阳率是10%，第14天到了50%。
) n  d% }2 D  T; @4 C; K诱导方案是INF-γ 1000u/ml, 24小时后加CD3 50ng/ml, IL-2  300U/ml，之后2~3天半量换液，补充IL-2到300U/ml。
: s6 y, f& s0 ?+ _* J% n+ \培养基用国产无血清培养基。分离液是Ficoll 1.077。
8 Q/ P$ e! z& n* n# w0 t7 c可是养脐血CIK时，分离方法和诱导方案以及培养基都相同。- r5 t6 ]% P' d4 Y2 ]
第3天的时候，可见少量增殖团生成，到第7天检测时，双阳率在0.5%以下，2 w9 n" K" P9 z+ s0 R% k
之后培养基又用PRMI 1640+10%FBS，以及在培养基中加10%自体血浆。
9 B+ f( h2 T" [5 s5 W, s重复4次试验，都是只见增殖团，流式检测时，双阳率都在1%以下。
( v  t7 O/ b. D/ _7 H1 ?恳请高手帮忙分析一下原因啊，谢谢。

liutianhua

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6 M! T2 Q' F# M9 d& _/ v
# @/ ^* p2 ~9 y3 x6 [  P脐血有很多性质与外周血不同，毕竟没有经过阴性筛选和阳性筛选，其实我很怀疑外周血方案用在脐血行不行，因为我也做过，效果时好时坏。

bloodroses

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: l8 ~3 N# P+ k/ J1 ?
9 T' W* c, A; T0 ?4 i2 _谢谢您的回复

莫邪小仙

哎，我的问题和楼主恰好相反，同样的方案用在脐带血上养的很好，而用在外周血上却是一直死亡。。。。

bloodroses

回复 莫邪小仙 的帖子% E2 R# C. Q0 y. v" J- H

2 p7 g; n4 c$ B3 R8 F& d' n8 A请问脐血CIK诱导方案你用的是什么啊？

莫邪小仙

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' b; e: u# ^5 Q4 _4 A+ J
) }' p" \' Q5 a6 C6 R0 l( G和你的方案差不多，只不过24h后除了CD3和IL-2还加了IL-1，而且IL-2的浓度是500，之后也是换液，保证换液后的浓度是1左右。就这样。用这个方案养外周血的却养不好，咱俩的问题颠倒过来了。。。血清都是用的1640+10%FBS

liutianhua

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; M! e& y+ p( s3 b, x5 g/ Y8 o+ G7 V" S6 o
外周血的怎么一直死亡呢，能传个图片吗？

bloodroses

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  p5 Y, d2 U* z3 r3 z3 E
. j% p7 K* p3 C( n( C我的没有加IL-1，而且IL-2的浓度也只有300U

lyd20042004

bloodroses 发表于 2013-1-15 15:45
. y+ |' O: s  ^3 B6 Q5 D小弟刚刚接触CIK，养外周血CIK时，增殖团的数量和体积都相应增加，第7天双阳率是10%，第14天到了50%。
5 u% O+ J/ o8 z1 Y9 D诱导 ...

* M, u1 ^( n& H/ t& ?* s+ q
双阳率第14天到了50%，请问是是平均还是个例，如果是平均是什莫牌子培养基？

bloodroses

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9 [) A  a# N" m# ?8 b8 u) W4 N0 e) G- f2 V
目前的数据只是个例
" {; }5 f( |( G( q- b数据还在积累中，平均值是多少，现在还不好说