请教关于脐血CIK细胞增殖团与CD3，CD56双阳性的问题

bloodroses

小弟刚刚接触CIK，养外周血CIK时，增殖团的数量和体积都相应增加，第7天双阳率是10%，第14天到了50%。. }4 @3 x  R7 o& p$ h2 B- M2 b, e" m; Q. |
诱导方案是INF-γ 1000u/ml, 24小时后加CD3 50ng/ml, IL-2  300U/ml，之后2~3天半量换液，补充IL-2到300U/ml。
6 H" O4 V5 p; U8 n培养基用国产无血清培养基。分离液是Ficoll 1.077。5 p) ?( F& m  Q, v+ Y
可是养脐血CIK时，分离方法和诱导方案以及培养基都相同。
8 x4 X5 X! o% ?" L4 f第3天的时候，可见少量增殖团生成，到第7天检测时，双阳率在0.5%以下，
3 W5 n$ F% r* A' T$ e! d之后培养基又用PRMI 1640+10%FBS，以及在培养基中加10%自体血浆。
6 Q9 V( M8 D8 b. _9 p8 B9 X重复4次试验，都是只见增殖团，流式检测时，双阳率都在1%以下。5 y8 F" s- E1 p
恳请高手帮忙分析一下原因啊，谢谢。

liutianhua

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. ]+ t; c9 m9 F. `5 }  d  ~2 h* }+ B3 o: X) Q5 j! m, c7 B5 N$ z/ s
脐血有很多性质与外周血不同，毕竟没有经过阴性筛选和阳性筛选，其实我很怀疑外周血方案用在脐血行不行，因为我也做过，效果时好时坏。

bloodroses

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7 I7 ^: H7 T( m1 C
4 E( i+ i8 m& k2 F5 I  _7 ?. r( i& j谢谢您的回复

莫邪小仙

哎，我的问题和楼主恰好相反，同样的方案用在脐带血上养的很好，而用在外周血上却是一直死亡。。。。

bloodroses

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! p7 A$ L! B6 k0 p$ S9 b' A
" O( {2 E& ]) _) |; g& I) }4 v+ [请问脐血CIK诱导方案你用的是什么啊？

莫邪小仙

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: U9 ?9 x. l8 k
  f, E) Q( N8 X和你的方案差不多，只不过24h后除了CD3和IL-2还加了IL-1，而且IL-2的浓度是500，之后也是换液，保证换液后的浓度是1左右。就这样。用这个方案养外周血的却养不好，咱俩的问题颠倒过来了。。。血清都是用的1640+10%FBS

liutianhua

回复 莫邪小仙 的帖子2 S( L: N- O4 s* P0 n4 Q

# q8 E1 d0 f/ X+ Q/ y. J% `外周血的怎么一直死亡呢，能传个图片吗？

bloodroses

回复 莫邪小仙 的帖子- C1 \" g1 S6 F8 `7 N; Q" [

( y: X8 P' f& K& A* f  K5 n我的没有加IL-1，而且IL-2的浓度也只有300U

lyd20042004

bloodroses 发表于 2013-1-15 15:45 2 }& @( h$ K7 X  K- o  Q4 b1 ?
小弟刚刚接触CIK，养外周血CIK时，增殖团的数量和体积都相应增加，第7天双阳率是10%，第14天到了50%。
/ r0 q* ^7 K6 N! v4 a诱导 ...

; `( ~' _- S- f8 V6 d5 ?双阳率第14天到了50%，请问是是平均还是个例，如果是平均是什莫牌子培养基？

bloodroses

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8 B4 V1 u, o( K( X) {% x
% c2 V5 s* a7 U目前的数据只是个例5 Y" |: p5 L5 I& ]$ d
数据还在积累中，平均值是多少，现在还不好说