请教关于脐血CIK细胞增殖团与CD3，CD56双阳性的问题

bloodroses

小弟刚刚接触CIK，养外周血CIK时，增殖团的数量和体积都相应增加，第7天双阳率是10%，第14天到了50%。
8 K) L5 g, w  K8 r诱导方案是INF-γ 1000u/ml, 24小时后加CD3 50ng/ml, IL-2  300U/ml，之后2~3天半量换液，补充IL-2到300U/ml。& C( X' U, K4 @0 c1 C
培养基用国产无血清培养基。分离液是Ficoll 1.077。
8 W6 u' p0 p; P9 ]) ?5 f# m7 L可是养脐血CIK时，分离方法和诱导方案以及培养基都相同。$ L! h; R" ^# ]9 i4 z# ]0 E
第3天的时候，可见少量增殖团生成，到第7天检测时，双阳率在0.5%以下，
3 V- c9 s( n& ^3 }' a% B之后培养基又用PRMI 1640+10%FBS，以及在培养基中加10%自体血浆。
; a% d6 |% W& x重复4次试验，都是只见增殖团，流式检测时，双阳率都在1%以下。
" e- m" Y; f/ {% D恳请高手帮忙分析一下原因啊，谢谢。

liutianhua

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* v/ A3 Q: Y! x7 x/ T脐血有很多性质与外周血不同，毕竟没有经过阴性筛选和阳性筛选，其实我很怀疑外周血方案用在脐血行不行，因为我也做过，效果时好时坏。

bloodroses

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3 F6 v0 _4 ~3 o; ^: J5 J: {6 K9 f$ ^
谢谢您的回复

莫邪小仙

哎，我的问题和楼主恰好相反，同样的方案用在脐带血上养的很好，而用在外周血上却是一直死亡。。。。

bloodroses

回复 莫邪小仙 的帖子. u; ]) s5 u0 Y' H$ A, b& T
" G, t$ o# C8 S5 E+ w& ~, e
请问脐血CIK诱导方案你用的是什么啊？

莫邪小仙

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7 u0 F$ W3 ?! q/ x0 f; h) M) u( E. C# d! g
和你的方案差不多，只不过24h后除了CD3和IL-2还加了IL-1，而且IL-2的浓度是500，之后也是换液，保证换液后的浓度是1左右。就这样。用这个方案养外周血的却养不好，咱俩的问题颠倒过来了。。。血清都是用的1640+10%FBS

liutianhua

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; k3 u9 W3 d0 ~' n5 S: U0 f# w$ \( Z4 w6 t  x$ k6 }9 W8 B! S3 d
外周血的怎么一直死亡呢，能传个图片吗？

bloodroses

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1 x: _2 \, G" D* \& U' h; w+ v2 ]' z7 b5 t
我的没有加IL-1，而且IL-2的浓度也只有300U

lyd20042004

bloodroses 发表于 2013-1-15 15:45
" c9 d; i& ]& S, n% w/ z小弟刚刚接触CIK，养外周血CIK时，增殖团的数量和体积都相应增加，第7天双阳率是10%，第14天到了50%。9 ?' }) c% ?8 x, ~& }" B
诱导 ...

! V6 c+ B% C6 I2 K8 J双阳率第14天到了50%，请问是是平均还是个例，如果是平均是什莫牌子培养基？

bloodroses

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1 V! K8 o/ W! P  |; \4 u/ n7 P4 C8 J  `# u
目前的数据只是个例
7 t8 j/ O. u  g) K* V, ?6 c数据还在积累中，平均值是多少，现在还不好说