分离PBMC时的疑问？ - 免疫细胞治疗专区干细胞之家



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查看: 85331\|回复: 21	go 分离PBMC时的疑问？ [复制链接]

gengtongyu521

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楼主

发表于 2013-1-23 10:42 |只看该作者 |正序浏览 |打印

分离PBMC时，有时会多吸取一些下方的分离液，以免细胞的浪费，这样，再离心时会不会不容易使单个核细胞离心下来，而悬浮在液体中呢？

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22楼

发表于 2013-5-28 22:47 |只看该作者

不会有影响，加PBS混匀稀释后分离液的浓度很低了，不会使细胞悬浮离不下来的。

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weijunning

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21楼

发表于 2013-5-8 15:20 |只看该作者

本人建议只要把白膜层吸干净就行了，没必要再吸一些分离液进去。如果用于CIK培养，2X107的PBMC就行，完全能将细胞养到109. 因为分离液也是对细胞有毒性的，如果清洗不干净，反而影响细胞生长。

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cheeray

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20楼

发表于 2013-5-7 11:03 |只看该作者

如果你怕收集不全。可以收集时多加几个管。

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joe_binyang

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19楼

发表于 2013-4-26 16:35 |只看该作者

回复 gengtongyu521 的帖子# F/ K8 a; f( g3 j. F

充分混匀稀释液是必须的，分离液是水性的，只要混合充分，一定能溶解扩散，不影响效果

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wwxx66

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18楼

发表于 2013-4-20 17:15 |只看该作者

不充分混匀肯定离心效果不好，吸白膜层时尽可能将白膜层洗干净，将白膜层吸出后加入到生理盐水或PBS中，离心前上下翻转一下离心管使其充分混匀，然后2000转，8-10min就可以避免细胞的丢失！& n4 `: d' c# y# h5 o: h
你可以将上清液再次倒入新的离心管中再次离心看一下，我就尝试过，混匀充分后，不存在细胞的浪费！