关于二抗IgG、IgM的选择，请问要分亚型吗

请叫我晓白

请问如果一抗是小鼠抗大鼠IgM，是否二抗必须选择抗小鼠IgM的二抗？
& O$ i! E) o# b( K% C* i* y. J如果一抗是小鼠抗大鼠IgG1，那二抗需要选择针对IgG1的二抗还是只需要选择抗小鼠IgG就可以了?
0 o. h" v9 O# ]有的一抗表明了抗体的亚型，比如IgM、或者IgG1、2等
, c  L% U4 @( P  w+ G请问这对选择二抗有什么影响

xiangyu83

回复 请叫我晓白 的帖子/ |4 @/ z! F& S9 s* H; b

/ z) z8 w& q% l  d; G) v: n3 \一抗来源是兔和小鼠，那么你二抗分别选择抗兔和抗小鼠的就可以了吧，两个二抗分别标记不同颜色荧光。两个一抗可以同时孵育也可以分别孵育，需要摸索条件。经验是特异性结合能力弱的先孵育，再加特异性结合能力强的一抗。二抗一般不需要分开孵育。

xiangchou812

还是看一下地板层的回复吧，感觉楼主还是没把一抗二抗搞清楚。一抗是靶向所要研究的组织中的目标抗原的，二抗才是带有荧光标记、与一抗结合的。

xiangchou812

还是看一下地板层的回复吧，感觉楼主还是没把一抗二抗搞清楚。一抗是靶向所要研究的组织中的目标抗原的，二抗才是带有荧光标记、与一抗结合的。

请叫我晓白

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0 t2 N5 S* @( `5 ~* P4 ?" R6 S! w: I- m* d: g' H* m
大鼠组织。因为我做双标已经买了一种兔来源的一抗了，另外一种只有小鼠的了啊
3 h9 E6 v. ~; @; O1 i4 M; [其他来源的貌似很少啊。有什么办法克服吗？

xiangyu83

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% g" D: K- r) s+ ?0 e* p& i
; i9 X$ U3 _" V. o. ~不清楚为什么必须用小鼠来源一抗，你的组织或细胞是什么来源的？

请叫我晓白

回复 xiangyu83 的帖子3 R1 \1 S3 p: h% z0 i% J; L- L
0 `, O) h/ j+ u" {+ U! N- H/ ~
我目前做荧光双标，必须要小鼠来源的一抗，但搜来搜去就只发现这一种，但是是IgG。不知道染色效果怎么样啊

chutu

- S# o7 j4 N0 R
7 s4 n( d1 W: r
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( x8 g1 x: g& v好像楼主开始就把一抗、二抗搞反了。一抗是against某个特定抗原的，一般是单抗，单抗才有分型的说法，多抗里什么类型都有。单抗多数是小鼠来源的，也有大鼠和兔源的。二抗是against一抗免疫球蛋白上的抗原决定簇的，各抗体亚类包含不同的抗原决定簇，所以如果二抗选择单抗，就必须是抗一抗的那种亚类的。但是二抗一般用多克隆抗体血清，因为可以通用，不用管一抗所属的亚类，只要知道哪种动物来源的那类抗体，IgG还是IgM，多克隆抗体血清都有效，可以把其上偶联的荧光分子或显色酶等结合上去

xiangyu83

目前绝大多数一抗都是IgG，比较成熟。个人意见，不是实验必须需要，选择IgG的一抗即可。

请叫我晓白

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4 b* a8 L+ ]  g1 ~- u8 h) ~
! C% Y) r! L' s多谢指导。请问一般来说IgG和IgM哪种抗体效果好一点呢？据说IgG效果更好是吗