关于二抗IgG、IgM的选择，请问要分亚型吗

请叫我晓白

请问如果一抗是小鼠抗大鼠IgM，是否二抗必须选择抗小鼠IgM的二抗？; b1 @8 z% y: j% `; M
如果一抗是小鼠抗大鼠IgG1，那二抗需要选择针对IgG1的二抗还是只需要选择抗小鼠IgG就可以了?
. C3 W+ H8 S2 _& v+ V+ i有的一抗表明了抗体的亚型，比如IgM、或者IgG1、2等
8 n  Y; {3 E1 Q7 _& S请问这对选择二抗有什么影响

xiangyu83

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一抗来源是兔和小鼠，那么你二抗分别选择抗兔和抗小鼠的就可以了吧，两个二抗分别标记不同颜色荧光。两个一抗可以同时孵育也可以分别孵育，需要摸索条件。经验是特异性结合能力弱的先孵育，再加特异性结合能力强的一抗。二抗一般不需要分开孵育。

xiangchou812

还是看一下地板层的回复吧，感觉楼主还是没把一抗二抗搞清楚。一抗是靶向所要研究的组织中的目标抗原的，二抗才是带有荧光标记、与一抗结合的。

xiangchou812

还是看一下地板层的回复吧，感觉楼主还是没把一抗二抗搞清楚。一抗是靶向所要研究的组织中的目标抗原的，二抗才是带有荧光标记、与一抗结合的。

请叫我晓白

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大鼠组织。因为我做双标已经买了一种兔来源的一抗了，另外一种只有小鼠的了啊
  Z6 M& Q3 l; g5 k其他来源的貌似很少啊。有什么办法克服吗？

xiangyu83

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不清楚为什么必须用小鼠来源一抗，你的组织或细胞是什么来源的？

请叫我晓白

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1 {; i1 {- o, e8 y( t我目前做荧光双标，必须要小鼠来源的一抗，但搜来搜去就只发现这一种，但是是IgG。不知道染色效果怎么样啊

chutu

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5 b4 K# j; W' B- X* K4 H' ^回复 请叫我晓白 的帖子
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2 ?( U: d: T0 a4 R0 R, e* G好像楼主开始就把一抗、二抗搞反了。一抗是against某个特定抗原的，一般是单抗，单抗才有分型的说法，多抗里什么类型都有。单抗多数是小鼠来源的，也有大鼠和兔源的。二抗是against一抗免疫球蛋白上的抗原决定簇的，各抗体亚类包含不同的抗原决定簇，所以如果二抗选择单抗，就必须是抗一抗的那种亚类的。但是二抗一般用多克隆抗体血清，因为可以通用，不用管一抗所属的亚类，只要知道哪种动物来源的那类抗体，IgG还是IgM，多克隆抗体血清都有效，可以把其上偶联的荧光分子或显色酶等结合上去

xiangyu83

目前绝大多数一抗都是IgG，比较成熟。个人意见，不是实验必须需要，选择IgG的一抗即可。

请叫我晓白

回复 xiangyu83 的帖子. @) O$ |# D* @) Z
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多谢指导。请问一般来说IgG和IgM哪种抗体效果好一点呢？据说IgG效果更好是吗