关于二抗IgG、IgM的选择，请问要分亚型吗

请叫我晓白

请问如果一抗是小鼠抗大鼠IgM，是否二抗必须选择抗小鼠IgM的二抗？5 q- G, i/ D% r4 p3 m
如果一抗是小鼠抗大鼠IgG1，那二抗需要选择针对IgG1的二抗还是只需要选择抗小鼠IgG就可以了?
  j5 u/ @; \- ~4 R有的一抗表明了抗体的亚型，比如IgM、或者IgG1、2等
0 J2 _( s( S. y( o7 A9 t7 X请问这对选择二抗有什么影响

sun_happone

我也想知道，求高手~~~

xiangyu83

0 r& }% w9 a0 z
第一个问题： 是的。二抗必须指向一抗同型。- K8 S* M$ w/ j4 ?( Z3 N: l5 `0 K' F) a, M
第二个问题：一般实验不必区分亚型。IgG类的二抗是通用二抗，可以和各个不同亚型IgG结合。7 P5 {+ w& z. k; v6 x! H7 I& Y# I
以下是一些常识（copy）:5 U" ]# s; C3 l) @% z) W
二抗需与一抗的类别或亚类相匹配。这通常是针对单克隆抗体而言。多克隆抗体主要是IgG类免疫球蛋白，因此相应的二抗就是抗IgG抗体.
* t% z/ U) @" h# o9 n& Z2 \单克隆抗体的类别及亚类通常会在产品列表中列出，如果你的一抗是小鼠IgM，那么相应的二抗就应当是抗小鼠IgM，或是抗小鼠IgG抗体。
4 S1 y/ a4 X9 M; o5 i$ D8 f6 c5 L如果单克隆一抗是小鼠IgG的某一亚类（IgG1，IgG2a，IgG2b，IgG3），那么几乎所有的抗小鼠IgG都可以与之结合，或者你也可以选择专门针对这一亚类的二抗，例如，如果你的一抗是小鼠IgG1，那么你可以选择抗IgG1的二抗，此种抗体在双标记实验中尤其适合。5 p* \( R  H3 J+ m! e4 ~1 v1 S9 Q0 u
如果你不知道一抗是哪一类别或亚类，那么抗小鼠IgG是一个不错的选择，因为此种抗体可以识别大多数类型的IgG免疫球蛋白。

请叫我晓白

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+ y0 N1 k# h1 Q7 ]" y8 _8 |+ Q  ]  ]
  ~, k3 v" y0 _) x- \多谢指导。请问一般来说IgG和IgM哪种抗体效果好一点呢？据说IgG效果更好是吗

xiangyu83

目前绝大多数一抗都是IgG，比较成熟。个人意见，不是实验必须需要，选择IgG的一抗即可。

chutu

. e1 a# d* Q% h& \
8 G' @) S/ `; B% p
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- D/ h( e+ [% r5 t; W" {2 O$ T# S4 A* K1 {
好像楼主开始就把一抗、二抗搞反了。一抗是against某个特定抗原的，一般是单抗，单抗才有分型的说法，多抗里什么类型都有。单抗多数是小鼠来源的，也有大鼠和兔源的。二抗是against一抗免疫球蛋白上的抗原决定簇的，各抗体亚类包含不同的抗原决定簇，所以如果二抗选择单抗，就必须是抗一抗的那种亚类的。但是二抗一般用多克隆抗体血清，因为可以通用，不用管一抗所属的亚类，只要知道哪种动物来源的那类抗体，IgG还是IgM，多克隆抗体血清都有效，可以把其上偶联的荧光分子或显色酶等结合上去

请叫我晓白

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' C- H; j7 c+ Q; m7 K1 W$ n6 _) C( M! i5 b* B3 u
我目前做荧光双标，必须要小鼠来源的一抗，但搜来搜去就只发现这一种，但是是IgG。不知道染色效果怎么样啊

xiangyu83

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; `8 T/ ^9 u! Z9 y  E, p
不清楚为什么必须用小鼠来源一抗，你的组织或细胞是什么来源的？

请叫我晓白

回复 xiangyu83 的帖子& p7 {2 X' s; Q+ |9 g

+ l; E  {( r  N( s9 ~6 a1 c大鼠组织。因为我做双标已经买了一种兔来源的一抗了，另外一种只有小鼠的了啊1 j1 N+ c; ]9 B1 V
其他来源的貌似很少啊。有什么办法克服吗？

xiangchou812

还是看一下地板层的回复吧，感觉楼主还是没把一抗二抗搞清楚。一抗是靶向所要研究的组织中的目标抗原的，二抗才是带有荧光标记、与一抗结合的。