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如何提高CIK细胞中CD3+CD56+的量?     [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2013-9-24 09:34 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
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最近在做CIK细胞培养方面的实验,按照最基本的培养体系——无血清培养基+CD3单抗+细胞因子(IFN,IL-2,IL-1),培养16天左右,CD3+CD56+细胞含量只有12%左右,低于文献报道,请问如何提高该细胞的含量,需要添加其他细胞因子吗,若要添加,浓度应控制在什么范围内?
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金话筒 帅哥研究员 小小研究员 优秀会员

沙发
发表于 2013-9-24 11:11 |只看该作者
你可以 尝试用 含有胎牛血清的培养基培养~  CD3激发型单抗能够模拟抗原与TCR/CD3复合物的识别和激活过程,从而引起T细胞的增殖与活化,因此是CIK细胞培养中不可或缺的刺激因素;IL-2还可刺激NK细胞的生长并增强其杀伤能力。因此CIK细胞培养中须添加IL-2,以促进T细胞的增殖与活化;在诱导CIK细胞形成的过程中加入IFN- g ,可降低IL-2的用量。研究发现,IFN-g加入的顺序与CIK的细胞毒活性密切相关。先加入IFN- g,培养24后再加入IL-2,可明显提高CIK的细胞毒活性。
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藤椅
发表于 2013-9-25 09:48 |只看该作者
回复 孙帅帅 的帖子- x/ a; Y" I$ G. t$ J

5 @, I& {% n" U3 kCD3激发型单抗?你用的是什么厂家的,型号能给一下吗?

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金话筒 帅哥研究员 小小研究员 优秀会员

板凳
发表于 2013-9-26 11:26 |只看该作者
OKT-3(CD3)肯定是 激发型单抗啊!!!
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报纸
发表于 2013-10-1 09:11 |只看该作者
回复 孙帅帅 的帖子7 \6 ~8 p% Q" T! p# M& o! L7 F

5 @8 D) F& O0 @, a谢谢,用做临床的话,我们是不能用含动物成分的试剂的,而且现在加的都是自体血清。
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地板
发表于 2013-10-8 23:09 |只看该作者
回复 人杰鬼雄 的帖子) k" o' l) l+ I5 s% \+ j/ d6 y, g
- i! W4 U8 `* [! n5 n2 R
请问 你用的是什么培养基

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7楼
发表于 2013-11-28 21:08 |只看该作者
回复 人杰鬼雄 的帖子) _  U: _' I# B. V
9 X( \$ r2 e2 e* H8 H9 C& g' S
能否将你做流式的FSC/SSC图、圈门以及CD3/CD56双参数图发上来看看呢?想向您学习一下,多谢了~

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8楼
发表于 2014-4-23 15:44 |只看该作者
回复 孙帅帅 的帖子
) a4 [: f/ [) e0 F' R- g5 o- d( ~* P* p) Z+ E0 W! r
想请教一下,如何提高双阳性细胞的比例,我一直培养的CIK数量不成问题,只是双阳性的细胞太少了。可否请教IFN-g因子使用的浓度么?还需要添加其他因子么?
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9楼
发表于 2014-4-23 16:45 |只看该作者
用宝日医的GTT551,效果还不错
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10楼
发表于 2014-4-25 15:57 |只看该作者
回复 人杰鬼雄 的帖子4 ^* f9 {# g% B  D5 \$ y: f

' d1 p% Z, R' ]; m5 Z  c其实现在做临床的好多也在用含太牛的血清,回输时经过清洗没什么问题的
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