不同大肠杆菌感受态的区别

zm19900508

TOP10， DH5a, StbI3 这三种感受态的区别是什么？分别适用于什么情况呢？各位走过路过的童鞋们帮帮忙解答一下啊

老十

DH5a是一种常用于质粒克隆的菌株。E.coli DH5a在使用pUC系列质粒载体转化时，可与载体编码的β－半乳糖苷酶氨基端实现α－互补。可用于蓝白斑筛选鉴别重组菌株。' {3 @( P* c# n7 p
0 E/ }  y( F- x  b: w
基因型：F-，φ80dlacZΔM15，Δ(lacZYA-argF)U169，deoR，recA1，endA1，hsdR17(rk-，mk+)，phoA，supE44，λ-，thi-1，gyrA96，relA1* m( m$ z3 M! U' C/ Y: B9 x
TOP10菌株
, K8 I5 {, Y4 L/ K2 P! z! u4 x% Y+ @7 @- g1 Z1 X5 Q+ \: j
该菌株适用于高效的DNA克隆和质粒扩增，能保证高拷贝质粒的稳定遗传。
  C5 F6 s# @% y- g- t
' P+ N9 w$ r  I3 {) \) m基因型：F- ，mcrAΔ(mrr-hsd RMS-mcrBC)， φ80 ，lacZΔM15，△lacⅩ74， recA1 ，araΔ139Δ(ara-leu)7697， galU ，galK ，rps， (Strr) endA1， nupG
$ f, N0 F* ^! A& @* Q* S可以看看别人博客里写的3 n; p* u& Z* o/ t) ]/ b5 W
http://bbs.sciencenet.cn/blog-444413-417709.html

weiyepan

DH5a转化效率最高，适用于常规克隆。! h" c; }  ~$ D* Z9 E( `8 Q
TOP10转化效率低很多，不怎么好用。
; W  r5 y' v- L: jStbl3主要用于比较大的质粒，提高其稳定性。

石山巨石

稳定性 stbl3 大于top10大于 DH5a
0 t1 N" ]1 _& u; ]效率是反过来的

石山巨石

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6 i/ u( i( g( K& C2 O/ ]3 e& f; s! f7 M8 ~
请教一下 是所有的pUC系列都可以做蓝白筛选么 还是 只有pUC19可以？

zm19900508

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+ O4 t+ T* l3 c% V+ \" k  U" F6 V* K, M. D1 e" n, P1 t+ r% G
多谢哈

zm19900508

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: T' }- Y2 p6 j/ G% |/ `+ I& j* P
% f, J3 a" V* l; d9 o- d) h谢啦

zm19900508

回复 weiyepan 的帖子5 j6 b1 T. q- v5 Y2 v4 C/ B7 c

; w2 d2 E* |* U0 c- n我们实验室一般用的是TOP10，慢病毒载体用StbI3,最近在做一批shRNA,菌批一直没有阳性

wf78365421

DH5a是大肠杆菌的一种菌株。DH5a的感受态是指细胞经过一些特殊方法（电击法、CaCl2法等处理后，细胞膜的通透性发生了暂时性的改变，成为能允许外源DNA分子进入的细胞，即感受态细胞(Compenent cells)。
& b& z0 m! S& ^$ b( l  ]- z, eDH5a转化效率最高，适用于常规克隆。
& r3 X2 Q, l# x1 E$ n: p+ I" p使用建议DH5a

weiyepan

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% J( K2 y% {4 a
. y0 w7 i; a+ \3 j: ]shRNA估计也是病毒的载体吧？用Stbl3吧。你是做克隆么？引物退火连接？然后转化没有阳性是么？