CD3CD56双阳性细胞流式分析-圈门（附图）！！！

rocfield

回复 lyj-0017 的帖子3 B( {- \) D/ S) D2 V
4 I# Q5 o. `& J
我是新手，不懂在回复中怎么发图。

各输己键

抗体量减半是可以的。

lyj-0017

回复 各输己键 的帖子
6 @6 q4 K& p' F) h: t
/ l' W- E- j& k: C) W你说的减半使用是所用荧光抗体量减半吗？还是细胞量减半？我不是太了解具体的参数设计，但是这个图是采用lin/log双参数显示的，应该还是比较合适的

各输己键

lyj-0017 发表于 2013-12-4 10:47
$ ]" D5 X& i% |回复 各输己键 的帖子4 S! J# r7 U( _2 j2 v

( |$ j9 w  B7 w4 I. F: J& ~1、PE电压是由流式细胞仪操作人员设定的，这个我不是太懂。

; k' R* c: Q: o
对染色的影响不是太大，不过我们一般都会减半使用的，有的可能还要减得更多；Biexponential可以有助于显示细胞群的全貌。你这个图还是挺好的。

lyj-0017

回复 各输己键 的帖子, ~2 \0 m- Q. I5 Y

7 f1 K1 G8 X) U' \1、PE电压是由流式细胞仪操作人员设定的，这个我不是太懂。
6 v1 r8 h  X5 b1 j2、荧光抗体是买的BD的，说明书是按每1X10^6个细胞加入20ul荧光抗体。如果我是5X10^6个细胞也是加20ul抗体，对细胞染色有影响吗？
2 u4 l" _) `+ I  a8 b3、Biexponential是什么意思呢？这个也不懂. D4 }$ A. v5 B' i5 l, `
4、流式细胞仪用的是BD FACSVerse TM

各输己键

lyj-0017 发表于 2013-12-2 20:03
+ \! i* C" V9 c回复 各输己键 的帖子
! }. [2 P6 D: I; v+ W: p1 x0 `, Z' i* r' ~
现在把双阳性比例图贴上来，能否发一个你们做的图学习一下呢？

$ q: `! q6 e, v$ t9 h( o; q3 n哈哈，我不做这个的。只是碰巧路过。3 j3 J7 _2 h  r6 w
) e% V! t, O2 m' i" R  J2 k
你这个应该说圈门，分析还是做的挺好的，细胞培养前后，FSC和SSC是有变化的，因此出现这样的图也是可以理解的，如果担心可以加上活细胞染料；另外，你PE的电压是给低了些吗还是抗体加少了，怎么需要用到Biexponential方式呢？机器是Cantor？  h0 T7 ^; {6 k4 Z1 ~
* u; v- U( d: C5 R: a2 k

lyj-0017

回复 shizaihappy 的帖子
4 L  d" m7 v5 b+ P# @5 }3 B
) v1 {: `4 I1 b" C4 a是啊，应该是圈淋巴细胞门。能否把你们做的流式图贴上来学习一下呢？

lyj-0017

回复 rocfield 的帖子8 Z) B/ ?5 o8 H9 ]$ }
) |0 x* v3 E' `3 ], Z3 m4 }' U
再请看下面贴上来的双阳比例图。能否发一下你们做出来的图学习一下呢？

lyj-0017

回复 各输己键 的帖子
/ F: `$ l) s: c) ?, `7 K( W3 y5 x' H' x* Y5 o/ ]
现在把双阳性比例图贴上来，能否发一个你们做的图学习一下呢？

shizaihappy

CIK测CD3CD56双阳率时圈的细胞应该是淋巴细胞，可以加个CD45，要是没有CD3，CD56也够用了