PBMC没有分离出来

momoenn

9 \# K) a' g9 A6 k5 p% h
( C2 R/ ^. Y! ~8 T  H* ]% f$ [
今天第一次做病人的外周血分离，无单个核细胞。外周血取得上肢静脉血，无动员，按程序操作，没有分离出单个核细胞。大侠们遇到过这种情况吗？在线等待。

zhrt

无动员是啥意思？
- \; Z' ~0 E9 T& S100ml能提很多啊，看看离心过程参数是不是有问题

momoenn

回复 heirrii 的帖子
6 ?6 e9 O, S) R; N
* k* r& ~. p2 d2 i稀释了，

momoenn

回复 weijunning 的帖子4 v: E( c& z) T2 O4 l0 W

! K* C3 [9 [, M; e) \* @胃癌患者，淋巴结扩散，肺部也有扩散到。之前其他实验室都是这样无动员直接从上肢静脉抽血。老师，你说的这个血象差是什么情况呢？看血常规报告白细胞计数正常。

草胞

回复 levell 的帖子' _- }/ Y, S% F0 q5 x5 t# O

5 Z8 j9 Y# ~) ^4 x9 b0 q) z0 _同意levell意见，离心的加速度确实很关键，要缓升缓降。一般不至于一点PBMC分不到。最好分之前，先测一下含量比较好。另外，分离液有质量保证吧。不好的分离液，液面会不明显

ccst4838318

回复 heirrii 的帖子( c2 F4 M; |, Z/ [

  ?) O8 c% p' z( k2 T5 K: W你怎么做的，怎么可能提不出来呢，正常的话100ml血液用Ficoll能提到1-2×108

weijunning

回复 momoenn 的帖子
8 y, E! W* x' _' o9 p" M& y+ o" v" S  i2 b3 M( u2 i
请问这个病人是什么病人？如果是癌症患者，无动员直接从上肢静脉抽血，很难获得足够数量的PBMC，有的血象差的病人基本上分离不到白膜层。所以，建议还是先动员一下再采血比较好。

levell

血液细胞用PBS稀释后加入到淋巴细胞分离液上，离心，注意离心加速度调到最低，很关键，不然起步和停止速度过快就会把液面打散了
' `' |8 @4 D& W* W+ Y+ ]3 z

heirrii

血液先稀释没

heirrii

100ml外周血，应该能分很多啊