组织贴壁法分离脐带来源间冲质干细胞的困惑

小夏

        采用组织贴壁法分离脐带来源的间冲质干细胞，组织块游离出的细胞很少或者基本没有，求教各位前辈：有那些原因会造成这种情况？

伊诺强

你先说你是怎么养的才能知道问题出在哪里

小夏

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把脐带清洗干净，剪成小段，剖开，剔除动静脉，分离出沃顿胶，剪成大约1cm3的小块，铺于75培养瓶。

伊诺强

确定是1cm3的小块？

伊诺强

培养基的选择，成分，添加量等等...........最主要的都没说

小夏

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; k3 r$ P% W) d% |大约

小夏

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   无血清培养基，添加血清替代物，谷氨酰胺。

屋檐上的乌鸦

你得剪碎组织块~！1CM3太大了

fuyinsheng

一是确定自己所加的培养基、血清、谷氨酰胺等成分没什么问题；
0 k& X6 s2 K$ m0 R- k二是脐带消毒处理时间不宜过长，会造成细胞活性丢失
* @" g4 u, s' W, ?三是脐带要剪的碎一些$ ?% @9 e" I5 A- |* I0 X5 ~
四是T75培养瓶中接种时培养基加11ml左右即可，加得过多影响细胞贴壁

fuyinsheng

另外确定自己的脐带是新鲜的，放置时间太长活细胞也基本没有了