CIK细胞培养一周死亡

sdzhxq

CIK细胞培养细胞提取时数量还可以的，但是培养增殖不是太好，一周后细胞就开始死亡，请问高手们怎么没回事啊？请高手指教

lyj-0017

回复 sdzhxq 的帖子: I, _* N7 [1 U* A+ Y
- E3 r4 X* k9 v7 p. l1 m/ ^
文献上有些数据都是胡编乱造的，不能只看国内文献，多看看外文文献

fenlichong

回复 sdzhxq 的帖子# a# a5 W) @9 z; w) p) j
# N' j+ [5 x# t
PBMC的细胞纯度我也不知如何确定，个人认为应该有如下几个指标：1.离心后获得的白雾状细胞层较纯，少红细胞参杂；2.多次洗涤离心，以去除混杂的血小板等；3.种瓶后镜检观察细胞形态是否均一。

sdzhxq

回复 holy0606 的帖子
# i, B! X, w6 [  V3 s: B
4 j( T2 \8 s* ^" }: b; B我们用的CD3不是进口的，可以吗？下一步可以试试50浓度的

sdzhxq

回复 hefan1234 的帖子7 R( y9 Q# y  g. j! J# ?6 R
+ c1 L. x; ?6 P9 A9 Z+ [
谢谢，按照提供的方法试试

sdzhxq

回复 fenlichong 的帖子3 c& N) z% `0 T5 O9 b8 m: D8 f

/ K; J, p# R. G( u  ]( ^+ K4 T: JPBMC细胞纯度怎么确定是否高于90%？我们实验室培养方法基本都是一致的，有的培养出口细胞增殖倍数也不高，最高40多倍，不像文献上说的增殖几百倍的。

牵着蜗牛去散步

一开始有聚团是正常现象，LONZA的培养基直接用就可以。有图片上张图片看看，关于接种浓度1.1x 106/ml 是可以的
3 p) Z3 e' ~" J# Z+ h0 S

holy0606

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; `: G0 }) L# _+ P% H/ S5 Q$ g) g# V7 H0 x5 t0 C! ]
1.5---2之間 ，試試看看

holy0606

回复 sdzhxq 的帖子$ b9 t  L6 J! N+ \$ E4 C

/ i8 _0 C/ s; T9 C! M7 qCD3的濃度有點髙，50就可以，

沙漠狐o0

培养基加多了。你试一下加10~20ml培养基...