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求iPS初期克隆图!万分感激 [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2014-12-9 17:33 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
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本人在做iPS,用的无饲养层,有克隆形成,但总感觉是太密所致。挑出来的细胞消化成单个细胞长不成克隆。挺奇怪的。哎!郁闷!
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沙发
发表于 2014-12-9 21:17 |只看该作者
没有feeder 细胞,不用挑单克隆。用EDTA消化成小细胞团,传代
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藤椅
发表于 2014-12-10 10:02 |只看该作者
需要消化成单个细胞,是做miPS?无饲养层的话最好用2i培养基,如果是做hiPS的话,消化成单个细胞很快就分化了,最好是团块传代。
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板凳
发表于 2014-12-10 12:14 |只看该作者
回复 scottist 的帖子
  X) g6 Z- a2 E6 h4 U
9 j0 ?* r* g9 e& X* s我做的是绵羊的。消化成单个长不成。
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报纸
发表于 2014-12-10 12:15 |只看该作者
回复 heirrii 的帖子- Y% e2 ^. J  q3 p  z+ |% @' }

$ x) |( d6 D9 f  H+ K# k可是,存在没有诱导成功的细胞,它们会增殖的。
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地板
发表于 2014-12-15 22:02 |只看该作者
回复 葱葱 的帖子
" w" @0 e) r# d- N" P3 w( H: B+ M- |7 Y4 M0 e8 [0 k  q" V
绵羊的不好做哈,好像这方面的文章比较少,自己最近也做了下,发下有克隆,但效率好低!
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7楼
发表于 2014-12-22 11:42 |只看该作者
回复 heirrii 的帖子
1 G- O5 ^6 P/ V3 b6 @, |) K1 y7 q) p
1 V& y4 s- m! I( C恩!可是初期有很多很克隆。但不确定是不是?还有一些未变化的细胞,所以必须纯化一下。
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8楼
发表于 2014-12-22 11:43 |只看该作者
回复 scottist 的帖子- }/ b1 Q5 h& S- \/ O

# |! h. p( N) T长的像葡萄状,挑之后消化一下,就长不成了!
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9楼
发表于 2014-12-22 11:44 |只看该作者
回复 Andyhigh 的帖子
) Y& ~0 s$ t5 {  D" y+ t% g* J! W2 N( h3 j5 A
你也在做绵羊?

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10楼
发表于 2014-12-22 13:38 |只看该作者
回复 heirrii 的帖子( s0 u$ y  e- f- F

- J. W, S' W% ]1 J; k" E/ s想问下你做个相关的试验嘛,你的"EDTA" 是指含有胰酶的EDTA,还是指其他什么试剂呢? 求解,目前我的iPSCs 克隆不是很好消化```
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