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求iPS初期克隆图!万分感激 [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2014-12-9 17:33 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
本人在做iPS,用的无饲养层,有克隆形成,但总感觉是太密所致。挑出来的细胞消化成单个细胞长不成克隆。挺奇怪的。哎!郁闷!
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沙发
发表于 2014-12-9 21:17 |只看该作者
没有feeder 细胞,不用挑单克隆。用EDTA消化成小细胞团,传代
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藤椅
发表于 2014-12-10 10:02 |只看该作者
需要消化成单个细胞,是做miPS?无饲养层的话最好用2i培养基,如果是做hiPS的话,消化成单个细胞很快就分化了,最好是团块传代。
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板凳
发表于 2014-12-10 12:14 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
回复 scottist 的帖子
) y( O5 b7 d' Y3 D. P/ h# w3 U: C$ m  O/ Y- ^8 I! \" M
我做的是绵羊的。消化成单个长不成。
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报纸
发表于 2014-12-10 12:15 |只看该作者
回复 heirrii 的帖子
. V6 t2 V9 S: o5 i3 Z% s  U
( e, |4 K7 h% g9 a可是,存在没有诱导成功的细胞,它们会增殖的。
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地板
发表于 2014-12-15 22:02 |只看该作者
回复 葱葱 的帖子6 z: e9 V; c- ~
8 N% M0 A% j& L1 |" z7 J9 p
绵羊的不好做哈,好像这方面的文章比较少,自己最近也做了下,发下有克隆,但效率好低!
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发表于 2014-12-22 11:42 |只看该作者
回复 heirrii 的帖子5 _' A: j- A3 H! ^

+ c- e+ `8 x7 e+ p) I恩!可是初期有很多很克隆。但不确定是不是?还有一些未变化的细胞,所以必须纯化一下。
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发表于 2014-12-22 11:43 |只看该作者
回复 scottist 的帖子
4 i- G! r& ^- e
6 `! b! l7 W2 ]2 v& t  ]4 J长的像葡萄状,挑之后消化一下,就长不成了!
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发表于 2014-12-22 11:44 |只看该作者
回复 Andyhigh 的帖子
3 x# p; T4 O: P) \0 s+ p" `! N# A0 z1 V9 v' A
你也在做绵羊?

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优秀版主 金话筒 研讨会精英 优秀会员

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发表于 2014-12-22 13:38 |只看该作者
回复 heirrii 的帖子
! [) |1 |' K, J& a( G
4 b* @; W0 g) a8 c8 [/ m- k) D想问下你做个相关的试验嘛,你的"EDTA" 是指含有胰酶的EDTA,还是指其他什么试剂呢? 求解,目前我的iPSCs 克隆不是很好消化```
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