大家冻间充质干细胞的时候冻存液比例是多少啊？

听不到

我现在冻间充质干细胞，按DMEM：FBS：DMSO=7:2:1进行的，可是不管原来细胞有多好，或者放在-80或者液氮，复苏后都基本不贴壁，很久以前我用FBS：DMSO=9:1冻存的细胞很好，想知道是不是现在血清比例太少了，主要是血清太贵了...其次就是有时候偷懒，用的DMEM里含有1%双抗，有没有人知道是不是因为含有双抗导致复苏不贴壁的？

sdwzg119

血清太贵可以提高一下冻存密度的嘛~~~~~~~~~~~

听不到

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7 J# [- o2 t9 K4 p' Y5 E我冻的细胞挺多的，具体没数过，但是100ml瓶，长了大概80,90%，冻两管，每管1ml冻存液，我觉得挺多的了...

yahooyeah

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) D7 J& w! v; ?6:3:1，血清30%还是可以接受的吧？血清确实挺重要。

chenlin080102

买现成的冻存液，冻存密度为400万/ml

yinchong42

双抗是不会有什么影响的，冻存液中我们都是标准培养基加上等体积血清，然后加上总体积10%的DMSO，
) K* m0 m( [( x2 p6 H+ ^2 H0 c另外复苏才是更废血清的，个人经验是复苏时最后将细胞复苏在正常细胞培养血清浓度两倍的培养基（而且至少要高于10%），不然细胞很容易死

nkcell

直接用细胞冻存液，和细胞的浓度是10的7次每毫升，效果非常好

fm100200

我用无血清培养基加10%的DMSO   10~7/ml   存活率挺高的

维维睡啦

你的FBS量太少，想省钱的建议用DMEM：FBS：DMSO=5:4:1的，这个比例还是比较好的，用的也比较多。培养基别加双抗的好，可以适当提高一下冻存密度。

suning5

血清贵毛？均分至每管，花不了多少钱。血清最好达到终体积一半