造血干细胞流式检测结果分析

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# D9 T* L, K& F% J5 E) j6 W4 L. ]% z3 F/ D. X& \- Z
大部分门的设置没有太大的问题，有两处有疑惑，第一个在调补偿的时候，同型对照也就是阴性对照的管的划门位置（R1）怎么划合适。第二个是调整后的R4的调整位置在哪里？

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回复 nailute1985 的帖子" o. z8 p- I/ u) @8 {6 C2 j- J

. s$ e; e4 v& ~# g我们此次是检测CD34+CD45+CD133，所以我们按三色的检测标准。# m0 p. ~$ u4 ^  w9 B& S: \
1.FITC+PerCP+APC的三个同型对照抗体加细胞* `, D9 t* s: G" A1 A" t6 A
2.FITC+PerCP+APC的补偿管，共3管
+ f! G$ j2 O* X/ [, f3.待测管+FITC+PerCP+APC三种抗体
/ R5 O. g. A! E5 {+ J$ g, _共5管

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9 Y" |/ u, k4 u* C' h! L) u
$ N% o2 }4 U7 m5 b4 ?不是吧。调补偿有专门的补偿管。阴性对照跟调补偿毫无关系好吧。一般以前我们是光细胞做阴对只是考虑了细胞的自发荧光，没有考虑细胞与抗体Fc段结婚，所以用同型对照来排除非特异性的干扰。

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" S& _* f. d2 @! F) G. e+ Q* j
* @3 E4 l; N4 z( b5 i这个我明白，我们都是调好的，然后检测待测管，这个没有疑问。但我们的第一管是加了细胞和三种同型对照抗体，这个是作为阴性对照来使用的。用待测管的值减去同型对照的值得到最终的结果.

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1 W+ c/ G0 o# X) I4 a- f( X我们根据您的说话，又重新分析了，发现结果高了差不多一倍。说明样品还是存在问题。我们的造血干细胞的样本里面含采集液，成分很复杂，估计有不少类似碎片东西。下次实验我们想标记前洗涤几次之后再标记，也许拖尾不会那么严重。