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楼主: SKC-SFC
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造血干细胞流式检测结果分析     [复制链接]

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发表于 2015-7-5 09:32 |显示全部帖子
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3 B, I* U# u# q2 C" `. H# n3 Z/ P( x
大部分门的设置没有太大的问题,有两处有疑惑,第一个在调补偿的时候,同型对照也就是阴性对照的管的划门位置(R1)怎么划合适。第二个是调整后的R4的调整位置在哪里?

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发表于 2015-7-5 09:34 |显示全部帖子
回复 nailute1985 的帖子5 H/ g* |# w# E7 C2 G$ C6 O

) D+ v$ K  w7 ?2 Q- M$ t3 A我们此次是检测CD34+CD45+CD133,所以我们按三色的检测标准。1 z! V& n; I) y+ W! W/ L) s
1.FITC+PerCP+APC的三个同型对照抗体加细胞1 I; d+ E) x( f* G
2.FITC+PerCP+APC的补偿管,共3管# F/ }- B" ^9 [. ^. O1 G
3.待测管+FITC+PerCP+APC三种抗体5 d* K! j% P6 r# P8 j- }
共5管
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发表于 2015-7-6 12:20 |显示全部帖子
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, G* i$ d7 L" C( k* P8 v% X7 G: @, Q; d! S8 k
不是吧。调补偿有专门的补偿管。阴性对照跟调补偿毫无关系好吧。一般以前我们是光细胞做阴对只是考虑了细胞的自发荧光,没有考虑细胞与抗体Fc段结婚,所以用同型对照来排除非特异性的干扰。
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发表于 2015-7-6 15:11 |显示全部帖子
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回复 nailute1985 的帖子3 ^$ _" q( H* q* u- Q

2 C# [' s5 _6 ?6 z6 s! R2 d; u4 \这个我明白,我们都是调好的,然后检测待测管,这个没有疑问。但我们的第一管是加了细胞和三种同型对照抗体,这个是作为阴性对照来使用的。用待测管的值减去同型对照的值得到最终的结果.
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发表于 2015-7-6 16:03 |显示全部帖子
回复 nailute1985 的帖子2 C/ M" m& |, c* ^6 l8 H& t
+ k# Q5 K+ I1 G6 Q
我们根据您的说话,又重新分析了,发现结果高了差不多一倍。说明样品还是存在问题。我们的造血干细胞的样本里面含采集液,成分很复杂,估计有不少类似碎片东西。下次实验我们想标记前洗涤几次之后再标记,也许拖尾不会那么严重。
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