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楼主: SKC-SFC
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造血干细胞流式检测结果分析     [复制链接]

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发表于 2015-7-5 09:32 |显示全部帖子
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回复 nailute1985 的帖子
- W, S$ Z9 m; {
+ U9 C4 X, P+ f0 M/ B大部分门的设置没有太大的问题,有两处有疑惑,第一个在调补偿的时候,同型对照也就是阴性对照的管的划门位置(R1)怎么划合适。第二个是调整后的R4的调整位置在哪里?

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发表于 2015-7-5 09:34 |显示全部帖子
回复 nailute1985 的帖子1 L) U# D* h3 z9 U9 ]
4 g) Z3 h9 Q5 i! o8 `$ N! i
我们此次是检测CD34+CD45+CD133,所以我们按三色的检测标准。7 ?0 N; h3 f5 p
1.FITC+PerCP+APC的三个同型对照抗体加细胞/ O0 i+ H& t2 m* F! {) I7 a2 w" g
2.FITC+PerCP+APC的补偿管,共3管$ A- c6 ~! h' N4 Z- q1 [! b
3.待测管+FITC+PerCP+APC三种抗体0 C0 h, p! N4 n' e! t# p8 g; [
共5管
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发表于 2015-7-6 12:20 |显示全部帖子
回复 nailute1985 的帖子1 [# G/ K; t& B' K( n) x4 [
% I) N9 R6 `' t$ ^" l+ W4 v
不是吧。调补偿有专门的补偿管。阴性对照跟调补偿毫无关系好吧。一般以前我们是光细胞做阴对只是考虑了细胞的自发荧光,没有考虑细胞与抗体Fc段结婚,所以用同型对照来排除非特异性的干扰。
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发表于 2015-7-6 15:11 |显示全部帖子
回复 nailute1985 的帖子+ @% e0 O) f! O0 B$ N+ T

# V' ^; E. ?' a5 a+ R3 U这个我明白,我们都是调好的,然后检测待测管,这个没有疑问。但我们的第一管是加了细胞和三种同型对照抗体,这个是作为阴性对照来使用的。用待测管的值减去同型对照的值得到最终的结果.
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发表于 2015-7-6 16:03 |显示全部帖子
回复 nailute1985 的帖子' |- ?4 f  [) k
+ X3 @" [) v5 h6 e& n- l7 o& }; I
我们根据您的说话,又重新分析了,发现结果高了差不多一倍。说明样品还是存在问题。我们的造血干细胞的样本里面含采集液,成分很复杂,估计有不少类似碎片东西。下次实验我们想标记前洗涤几次之后再标记,也许拖尾不会那么严重。
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