造血干细胞流式检测结果分析

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大部分门的设置没有太大的问题，有两处有疑惑，第一个在调补偿的时候，同型对照也就是阴性对照的管的划门位置（R1）怎么划合适。第二个是调整后的R4的调整位置在哪里？

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0 e" C2 N' L* Q/ ]! F# `我们此次是检测CD34+CD45+CD133，所以我们按三色的检测标准。* |3 y" O% r) n8 f0 j% |
1.FITC+PerCP+APC的三个同型对照抗体加细胞
$ b8 j! Y$ R( y7 ]2 O8 S# u2.FITC+PerCP+APC的补偿管，共3管' d+ D' L0 P* h
3.待测管+FITC+PerCP+APC三种抗体
( C" t; o& D% p+ o8 Q0 M共5管

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回复 nailute1985 的帖子% w( @8 P/ ~9 R  f1 q5 G- M

. H+ U3 r6 y8 [9 \; ?) [不是吧。调补偿有专门的补偿管。阴性对照跟调补偿毫无关系好吧。一般以前我们是光细胞做阴对只是考虑了细胞的自发荧光，没有考虑细胞与抗体Fc段结婚，所以用同型对照来排除非特异性的干扰。

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: r' s7 N7 V0 s% ~这个我明白，我们都是调好的，然后检测待测管，这个没有疑问。但我们的第一管是加了细胞和三种同型对照抗体，这个是作为阴性对照来使用的。用待测管的值减去同型对照的值得到最终的结果.

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回复 nailute1985 的帖子) ~+ A  e& X: t* Z- S0 }
; r8 }. b. ^) w7 b+ A* g/ t3 y
我们根据您的说话，又重新分析了，发现结果高了差不多一倍。说明样品还是存在问题。我们的造血干细胞的样本里面含采集液，成分很复杂，估计有不少类似碎片东西。下次实验我们想标记前洗涤几次之后再标记，也许拖尾不会那么严重。