求助：培养CIK细胞时候怎么去除红细胞？？？高人解答，谢谢

113305060

我做CIK细胞培养，首先提取外周血单个核细胞，但这里面会混有红细胞，接种到培养瓶中培养，取悬浮细胞继续加生长因子培养，但是取悬浮细胞的时候还是有红细胞在里面悬浮啊，而且以后换液传代都是取悬浮细胞，那么红细胞不是一直都混在里面吗？用红细胞裂解液2次仍然去除不了红细胞，求高人解答，谢谢

jxaf3900824

最方便的办法就是，用无菌注射用水裂解，把握好时间，一般时间控制在30秒就可以

漂泊的风

回复 113305060 的帖子5 Z7 [- D% B- |6 X4 U4 r2 K; c
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培养基的关系挺大的，一般1640培养基培养悬浮细胞，DMEM培养铁壁细胞，建议还是用1640培养，至于铁壁的细胞的出现是正常的，但是其和间充质干细胞是不一样的，其比较短，但是肥大，若加因子可以诱导为成熟的DC细胞。

evial

回复 LL87 的帖子5 c. D' N' \7 C% Q  E0 R

2 h& J5 ?, Y& L0 a$ A4 ~2 z流式专用的高渗的为什么不可以呢？掌握好时间就可以了么，然后洗去，我们都是这样的，要不然就用淋巴细胞分离液。

LL87

回复 evial 的帖子; N0 H7 A" Z7 ~- c# y+ B$ T
( y5 ^3 @/ l, k$ f; `6 N) Z
不能用流式专用的，因为流式专用的是高渗的

主流神话0654

最便宜的方法，离心以后，去掉液体，加入无菌注射用水使红细胞裂解就可以了。

zuming

关键看做什么用，如果是给病人回输的，混有一点点红细胞是无所谓的，不影响。没必要除掉。

113305060

回复 细胞海洋 的帖子
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% n( g. x! V; b3 e& s好的，谢谢

细胞海洋

回复 113305060 的帖子
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( [  O+ m2 v( ~1 K  o: c  x你回复谁 就点击对方回复帖子中的回复按钮 然后输入内容 像我这样7 N3 D1 ]( H5 f  Y- y" `

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另外建议重新发个贴子提问 这样问 很少有人能看到

evial

一种是直接破红，在血液里加入裂解液，是用于检测，因为要加说明说体积的裂解液。另一种使用分离液提取，这样基本就已经去除红细胞了。不知你用的是哪种。