CAR-T细胞转染请教

六弦七品

MOI低了转不进去，高了细胞又挂，大神们是如何解决这个问题的？

拉二胡的拉尔夫

1.逆转录病毒:优点：转导效率高。缺点：有引起插入致瘤的风险，不能感染非分裂细胞，病毒滴度低
* k; [0 c0 Z+ ~" t* H: g% Q# f2.慢病毒：优点：转导效率高，可转染分裂细胞和非分裂细胞，长期稳定的基因表达。缺点：成本高6 F% w: Y* K! N$ ~4 |8 n# ]6 `7 _
3. RNA电穿孔：缺点：瞬时表达（<1周），需反复注射

riverdtang

慢病毒，超离浓缩到8次方以上滴度，加polybrene，T细胞分离24-28h转，有50%转染率

ET生物人

回复 riverdtang 的帖子5 q: r& k/ p  o; l, t
9 R( S2 Y' d, G8 s7 J" |2 {1 c- i
T细胞分离24-28h转   请问 这是什么意思？？

riverdtang

回复 ET生物人 的帖子
2 y  s2 {$ T: J) m4 _: q8 t  F! k: i5 l) y# O3 b$ I
分离后48小时转，效率高些

ET生物人

回复 riverdtang 的帖子+ l& M3 r" `  S) `

$ W! e4 Q, l5 X- w5 Y4 ?2 B6 F# ]+ e2 S你是用什么培养基的？？我们用了好多方法，发现转染效率很不稳定 不知道是哪里出问题

riverdtang

回复 ET生物人 的帖子
4 z2 u$ K1 i, S! M# F; s
- [, \' V/ o0 t* p0 {takara，美天旎，lonza等养T细胞的培养基都可以，感觉培养基对转染率并没有太大影响

biluolinyu

转染不加血浆和抗生素算不算？

ET生物人

回复 riverdtang 的帖子9 W/ S1 @; E  u  X5 o' ^  I

' q8 \0 e- U7 `- W2 g那你觉得感染率是跟什么有影响？

lgfffancy

回复 biluolinyu 的帖子! r5 S  T/ s; v: R7 }* s  z) R4 K

( X" E* o' d; A- Etransfection的时候最好不要加抗生素，提高转染效率