免疫细胞分离的几种方法

shy-shen

表面标记分子法
& g  N& t  h0 ?; ~, YE-花环沉降法) z* t3 H, b& {. v+ E
人类T细胞表面有SRBC受体绵羊红细胞受体，能够与多个SRBC结合，形状如花环；' G* B, c' }, i! k9 G4 `( A* F6 `
亲和淘洗法
* f- E% m; N3 E特异性单克隆抗体包被在聚苯乙烯培养皿/板表面，吸附具有相应表面分子的目标细胞，如抗Ig抗体吸附B细胞、抗CD3抗体吸附成熟T细胞，这些都属于正选分离
7 y* d& z3 }+ W. V, k7 W细胞毒法
0 I2 l& r% E9 n9 @补体介导的特异性细胞毒分离法，在抗体的作用下裂解能与抗体结合的细胞，从而分离出不能与此抗体结合的细胞群，属于负选方法8 ]& i( i8 a3 X3 q4 y9 q! c
荧光激活细胞分离法
& `) a3 d( S2 T1 F7 `  z最有效法，目标细胞经荧光素标记单抗结合后，在激发光照射下会产生荧光，由FASC分选功能分选出来
) Q5 M2 @8 Q( B. k免疫磁珠分离法
3 C; _- A' V& k在磁珠表面包被特异型抗体，与目标细胞表面的抗原结合而与特定细胞粘附，再用磁珠分离9 I: c5 w% O8 G7 j" M$ A

. C0 N+ w8 V3 I1 r% W$ ?8 I对低渗的敏感性
  e/ _! v. W7 W8 x红细胞对低渗的敏感性要高于白细胞，例如红细胞裂解液6 L9 F( A$ x/ t

/ `0 l$ m+ o" P+ v6 l6 x相对密度差异! r; m1 j' [% {6 c+ r1 Y5 M) y6 B+ L
聚蔗糖-泛影葡胺密度梯度离心法即FICOLL
3 K2 [2 V( _" m: V# k. P红细胞和粒细胞相对密度大于ficoll，沉底；血浆密度最低位于最顶端；分层液位于中间，PBMC位于血浆和分层液的白膜层处8 Y& I! r( t- m/ C5 ]
PERCOLL密度梯度离心法/ S, e+ K" a: F0 f; t$ L
最上层是死细胞残片和血小板，然后是单核细胞层，然后是淋巴细胞层，最后是粒细胞和红细胞9 b/ R  r, v# I, j4 @

! L' J/ U! `( w$ O8 F黏附和吞噬能力% R8 p# g$ |* I; q1 G- c
单核和巨噬细胞具有较强的粘附能力，加入细微的羟基铁颗粒或乳胶颗粒，待单核和巨噬细胞充分吞噬后，用密度梯度离心或者磁场吸附去除，利用尼龙毛柱分离B细胞。
, W1 {3 T8 |2 u2 N5 X& O# |7 H' {+ r# E2 h9 s7 z( l, v( b+ }4 n/ \
特异性促生长因子
, F. \( a4 Q- ]- C& m利用不同种类的免疫细胞需要的生长因子不同进行促进生长