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楼主: xfyang2007123
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奇怪,神经干细胞消化后传代后细胞都消失了?(附图)   [复制链接]

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发表于 2010-11-4 23:21 |只看该作者
回复 9# xfyang2007123
3 B* g& F  A  v, h  ]1 R0 U+ D# K1 j' x! Y! w: U( K) _
如果是想半量换液,将含细胞的培养基离心后,上清全部取出后,在种细胞加入一半新鲜培养基一半旧的即可。
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发表于 2010-11-6 09:18 |只看该作者
回复 40# dingyx2009 - ?& t- W( d/ ~* W! Y
谢谢关注!那么请问你们用的胰酶/EDTA浓度是多少?我试过0.1%的胰酶基本可以达到目的。但是还是感觉对细胞破坏挺大的。
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发表于 2010-11-7 22:11 |只看该作者
离心的速度可以降低点,我用的是800转/分,3min,就可以了。而且我觉得还是应该终止消化。神经球的密度还是比较大的,一般这种速度就可以了。这样养出来的细胞比较好看。
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发表于 2010-11-8 20:10 |只看该作者
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我是直接离心,再用0.05%的胰酶37°消化十分钟,再轻柔的吹打数十下,再用sigma的trpsin inhibitor终止消化,最后离心去掉胰酶,传代培养就一直能养下来!
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