求Hela细胞成球培养条件

amosummer

请问Hela细胞可以进行成球培养？是否需要先在普通DMEM培养基里培养一段时间？如果是的话，在细胞达到多少覆盖率可以更换无血清悬浮培养基？希望各位不吝赐教！

深海寂寞鱼

to amosummer：
% B: h& o; }! j+ l/ f; o# j9 h2 n! V& \3 r) F- E
    请问你看到过哪篇文献里可以把HeLa细胞养成肿瘤球的吗？
2 r/ \8 i8 h8 V, ?/ U' q% C. m2 ?
3 [$ d- _4 h. Y8 F    第一，目前已有的英文文献中似乎还没有提到HeLa细胞可以形成肿瘤球的。只是有文献说HeLa细胞中有侧群细胞，但是没有进行功能验证。
' W2 j) ~  q7 s# h( J4 U! r  _# g& Z# p( F' C, }* \7 _
    第二，HeLa在目前常用的（DMEM/F12 + B27 ＋ EGF  +  bFGF）无血清培养条件下，是不形成肿瘤球的。. L! u7 P& l( v# [) C& V6 P- E

0 [6 f4 i1 M  B* b& l: M              当然如果你非要想让它形成肿瘤球的话，你可以尝试其它的培养条件。因为我还无法肯定的说，HeLa就根本不能形成肿瘤球。
1 V6 u9 W1 V# |  }% E. N
- U# c8 y# R( b6 F4 m, ]5 D  L     第三，如果你希望研究宫颈癌的话，如果你也希望用细胞系进行研究的话，如果也觉得细胞系研究可以证实你的实验假设的话。" f5 ?. x8 e0 m! [7 w5 t
           
- Y  T* ^; G5 V( h. P               我认为你可以试试看 C-33 A  细胞系，就是通常所说的C33A。它可以很容易的形成非常漂亮的肿瘤球。
4 a- t& N- ~- _" B- i& G  X5 k* z* F* {! d- ~7 A
               但有两方面你必须清楚：) ^2 e% d8 m) {/ E/ A# ~+ x' E
1 g# ~4 R6 G4 w/ M
               1. C33A是鳞癌、腺癌、腺鳞癌？这个问题不太清楚。ATCC没有给出明确的答案。
+ d' B- Z- _) G7 x0 S2 k
9 p" t% {* _) }' ?* h' I               2. 能形成肿瘤球，未必能实现你的实验假设。风险绝对不小。" w; v; M/ W' o/ ]; B. L
( }1 s0 l. ~- ^# D% }2 I  P
     个人观点，仅供参考。欢迎继续交流。

amosummer

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- l4 y/ a& _! `/ ]0 Y  Z8 b- p' G" }+ B' O8 @- ~
非常感谢！你的信息对我帮助很大！

深海寂寞鱼

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9 A8 l# I- ?- y4 W, k+ _6 U* }; ?
( X; G$ g# \8 G* c. C你太客气了。
2 t4 t6 A5 {+ j9 j$ C' d4 ]/ S# w& Q1 m& J# p/ S
能提供对你有用的信息，让我也很开心呢。2 I3 ^4 p4 n0 {6 I2 h3 H. P2 {2 y  D% o

' ^* n# M) R3 |3 y# J9 W' {- t欢迎继续交流。

Rena

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: i. i# S' N0 s) A2 f! k9 s1 ]( o
7 D! m" Y& q* b+ c. k你好，请问肝癌细胞株BEL-7402 、HepG2药物富集后可否无血清悬浮球培养，这方面的文献没有看到，麻烦赐教\(^o^)/~

深海寂寞鱼

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4 j& I$ O' x) J& g7 O
# E" I2 o; W5 Y9 D+ Tto Rena:6 l8 g# B9 n- g9 H; X, o
8 d  A( Z/ `* k2 i. K
    肝癌细胞株BEL-7402 、HepG2确实没有直接经验，不敢给你乱说。
  o' e, }/ v9 t) V5 V- A" E' m3 |; z
    但是Hep3B是可以在无血清培养基里形成肿瘤球。/ t0 i* i# t% O- x, Q& }

9 V3 ?& l% G# L! n& l    欢迎继续交流，共同进步。

深海寂寞鱼

回复 Rena 的帖子! r7 g9 W0 s$ l/ i% X6 Y
  `$ r7 K% {) ~4 b6 m/ _  C- z
to Rena:  ^" p2 q: v# g. \
4 t+ x% k6 Q3 H; w$ \
    肝癌细胞株BEL-7402 、HepG2确实没有直接经验，不敢给你乱说。; V; ^  u: G# j
4 x) z' w/ }3 D/ ?
    但是Hep3B是可以在无血清培养基里形成肿瘤球。
; W- a( [- u2 \$ U# I" N' ]
3 _; }" a8 X& K    欢迎继续交流，共同进步。

Rena

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: h/ w- A$ B' ?- |9 _/ r2 B4 h3 n6 L" L1 Z
谢谢，现在实验是采取化疗药物杀伤细胞富集CSC后诱导，结果很不理想，继续探索中。。。再次感谢\(^o^)/~

深海寂寞鱼

to Rena：. p4 Q1 G: o0 W5 }
3 x4 w9 t0 Q% q% {; |1 ~/ h
    个人建议：# w9 G& m( Y5 a# c' p" K

9 D; `# O( h) X, Z    1. 首先搞清楚你所用的细胞系本身是否符合干细胞模型，不然无论你做什么都是浮云。; F( V1 E5 c  Z6 ~

- B- V5 v  u% C  ^      （原因是不是每个细胞系就能拿来做肿瘤干细胞相关实验）2 W/ U1 k4 E, F- C1 _
& \9 U  q  v/ |! T+ p$ F. [; D
       尽量多查文献。尽量要有影响因子在5分以上的文献支持。& `) R  H: D1 J0 Q

% d5 C5 N6 Q, t% [" o  t" x    2.  采用化疗药物富集CSC不失为一个方法，但本身有很多不容易实现的问题。
0 w5 r" Q; u' M; Y+ G5 I- X; Y2 l+ Q2 t/ W
         i.  用哪种化疗药物才能杀死非肿瘤干细胞，而尽量让肿瘤干细胞活下来？
  u- ^6 Z! G! |' g0 a& t4 {- q$ q1 ~7 H% j
         ii. 这种药物用多大浓度合适？需要作用多长时间？; V. ], K9 m* H& B& L9 [

! ^, S! H" G' t         iii. 肿瘤细胞经过化疗药物作用后，是否还能保留其parental细胞的特性？& E) n# p  B# S" V  ]2 e+ W1 @
0 k  m! w& {" b/ R6 U6 @: e
         这些问题都是需要你探索的。要么就要有现成的参考文献。
: r: H3 }, f3 `9 U3 J2 Q
2 H5 r5 \3 [7 t" F4 A' C3 Y7 X祝实验顺利。

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回复 深海寂寞鱼 的帖子* q( Q' p. \3 X- j$ }& e
6 r4 F+ e; g4 I/ c
我现在也要用hela做，很多文献说能做出来了，到底能不能用 hela 跪求