淋巴因子诱导杀伤性（LAK）细胞长期培养：抗CD3、β-IL 1、IFN-γ和β的作用

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主题：淋巴因子诱导杀伤性（LAK）细胞长期培养：抗CD3、β-IL 1、IFN-γ和β的作用: i5 h: c# S' c7 y
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说明：原文来自the journal of immunology，干细胞之家新闻小组成员deron翻译（转帖请注明）9 s4 ^7 J  r' ?
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翻译内容：
# [; N7 W1 |4 g" u: o) L; Z$ Z+ B淋巴因子诱导杀伤性（LAK）细胞的长期培养：抗CD3、β-IL 1、IFN-γ和β1的作用, H( z3 X; q; B* Q4 U+ W  c; _0 ^
外周血淋巴细胞（PBL）在含IL-2的常用组织培养基中培养，可以获得溶解新鲜肿瘤细胞的能力，这些细胞被称为淋巴因子活化的杀伤性（LAK）细胞。LAK活性在5d的培养后达到顶峰，随后急剧下降。我们研究了培养条件，并培养出能够长期培养扩增且具有LAK活性的细胞。细胞通过在相关的低密度培养和常规补充培养基及重组IL-2（r-IL 2）后，LAK功能较短期培养有显著提高，而且可以培养至少21天的同时细胞数量扩增到100倍。通过用抗CD3(OKT3)单抗和r-IL 2刺激培养物后，可以在保持类似LAK活性的同时，获得大约1000倍的扩增数量。β白介素1（β-IL 1）、干扰素β（IFN-β）或干扰素-γ（IFN-γ）的外源加入，能够增加抗CD3、r-IL2扩增细胞群的溶解活性。较目前3-5天的培养体系而言，上述改进可以让个体供者在体外培养中获得更多数量LAK细胞。
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& O, j5 S% s! M7 r原文：  

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这篇文章在当时应该算是一个里程碑式的改进吧,已经用到了目前CIK培养中的抗CD3和IFN。  l! _2 n, b% z
研究者在文中做了一个不错的对照
0 d$ X( N& ^4 `5 p6 y! m# J1.        单独使用IL-2和组织培养基（TCM）——获得30-100倍的扩增数量。
3 @1 w& ~( [5 r# v: W$ t2.        前两天使用抗CD3抗体作为最初的刺激信号，这明显增加了有LAK细胞活性的细胞数。
9 `, K# i4 J. Y7 @" ~! A) M0 B  A3.        在2中的最后两天加入β-IL1、IFNβ或γ，进一步增加了LAK活性。8 F, q* U1 \  F3 b; j2 H( F
而且研究者已经开始使用E.coli产出的高度纯化的重组IL-2，而不是像之前那样——20%体积的IL-2……$ M  x( @6 X6 y, E
之前介绍的经典方法，以1×106/ml的数量在含r-IL2的组织培养基中培养，第5d到达顶峰，第6d便急剧下降。而如果降低培养密度，以0.5×106/ml的较低密度起始培养，并每2d补充新鲜培养基和IL-2，将密度始终控制在1×106/ml以下，可以延长至14d。7 z# i4 J; C2 x- Z5 X( Q
作者加入抗CD3后，细胞数在21d内增加了1000倍——不用抗CD3的，只扩增了100倍，差距啊～，虽说细胞数上去了，但是前5天的LAK活性确下来了，说明扩增的细胞不是LAK效应细胞，或者说抗CD3的加入延迟了LAK效应细胞的生成；或者说早期增殖的T细胞是无杀伤性细胞。但在21天的最终杀伤活性则远远超过了不加抗CD3的。  V8 D' F6 n" H) O2 L* t$ V% Z
总的来讲，这篇研究的意义在于- q) O! }% |& B4 U
CD3和IL2的加入，显著增加了LAK细胞活性功能
/ N: @! k7 c; d6 K3 n9 ~$ E3 \βIL1、IFNβ或γ，增加了培养中的细胞溶瘤活性。