关于PCR时Taq酶的选择

军医

从cDNA上扩片段，大家觉得通常用什么Taq酶效率比较高，扩的效果好呀？

like_gj

我们实验室用的都是TaKaRa的，保真性比较好 不过有点贵
+ j; K) O3 H$ B, Z/ FFermentas也还可以吧 毕竟cDNA扩的不长 一般的酶应该都可以

zhangyan813

不知道打算克隆什么基因，这个基因是不是高表达基因，要是高表达基因用宝生物的普通的rtaq酶应该就没问，关键是看你的引物怎么样；要是这个基因不是高表达的，或者你后续实验对基因要求很高，可以考虑用宝生物的高保真酶，或者EX tag酶。

军医

回复 zhangyan813 的帖子0 }( Z, q' m; l

  ]$ p; L5 {; w; @宝生物的高保真酶以基因组为模板还挺好，以cDNA为模板效果一般，用primestar没有扩出来，只扩出来一次就再也没扩出来了

军医

回复 zhangyan813 的帖子( j# I0 l: p' j$ ]0 `0 M* V
6 G3 C' M. f+ |# A$ {
宝生物的高保真酶以基因组为模板还挺好，以cDNA为模板效果一般，用primestar没有扩出来，只扩出来一次就再也没扩出来了

hndxws

toyobo的kod很好，我已经用这个在cDNA里克隆三个基因了

shqinzhu

如果是长片段的话，我一般用LTaq,段片段高表达，普通的taq, 高保真用的HiFi

rain2402

短片段用EX-taq就行（TaKaRa的，Fermentas的，天根的）长片段用LA-taq，（TaKaRa的）

sylar.wy

rTaq : 高突变率, 扩增效率较高, 适用于菌落PCR的鉴定. (推荐产品东盛科技的PCRmix(2×) 1000×10ul 体系180元.
7 c% g: A& v, {4 P5 `" xExTaq: 适合2Kb一下片段的扩增. 具有比较好的保真性(Takara不错).
/ H/ ^6 J" h2 _. @, _, x+ EUltraPF: 2kb以上. 高保真,高速度. (复能, NEB,Takara).

wang3033

1.一般扩增就用普通的Tag酶即可，国产的鼎国普通的Tag酶成本1U<0.2元。
, {6 Y' V2 }- o. M2.做克隆用Pfu酶即可，国产的鼎国Pfu酶成本1U<0.5元，反正我用的挺好，当然用全是金的Transtar酶也可以，比鼎国的略贵。9 R+ z1 g) r; n9 F: I
3.PCR扩增国产的Tag酶，Pfu酶完全可以胜任，用进口的洋货没有必要，想要烧钱，就用进口的。