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[请教] 支原体检测   [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2011-8-7 15:56 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
老板让我把支原体检测技术建立起来。看了点文献有关于一次PCR和巢式PCR两种方法,不知道该选择哪种?望各位都说一下自己实验室的办法。不胜感激
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沙发
发表于 2011-8-7 16:04 |只看该作者
荧光素酶检测体系
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藤椅
发表于 2011-8-7 17:39 |只看该作者
回复 bllx58 的帖子
3 z* R. m$ h8 t5 I+ U4 t; L
: _  B5 {0 z! E8 z5 }5 Y问一下你们实验室所采用的荧光素酶检测系统准确性和特异性如何?上次碰到一个销售干细胞血清的业务经理告诉我目前国内许多支原体检测试剂都质量不过关,假阳性和假阴性太多。目前特异性比较好的检测方法还是支原体培养和PCR检测。不知道你所采用的荧光素酶检测是哪里的?
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板凳
发表于 2011-8-7 18:39 |只看该作者
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一般生物学实验室用简单的PCR就足够了
2 d$ O8 y6 d4 j# j我们就用一对引物的PCR, I3 @# j6 M, I3 w" w
2 M. M9 J2 @4 _
作临床,做生物制品的,也许要用严格些的方法
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报纸
发表于 2011-8-7 23:02 |只看该作者
回复 wwwert 的帖子
2 X6 E) @+ V' Z0 L& M9 Z+ ~, j; k
能不能把引物序列发一下啊?还有我看到在PCR检测过程中最忌假阳性与假阴性的出现,贵实验室是怎么注意的呢?
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地板
发表于 2011-8-8 09:08 |只看该作者
我个人觉得巢式PCR比一次PCR效果好。
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发表于 2011-8-8 11:50 |只看该作者
我们最近也在做支原体检测,可是总感觉结果不是很理想,假阳性或者假阴性太多,有没有稳定一点的结果
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发表于 2011-8-8 11:51 |只看该作者
回复 rain2402 的帖子) z3 h9 \# @* c7 W9 l

2 m. `5 J' b: |+ `# D巢氏PCR的结果稳定性怎么样?

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发表于 2011-8-8 14:26 |只看该作者
回复 牙牙丫丫123 的帖子% p$ }/ k* z1 p% l& {7 F" u3 ]

" C/ v- _+ X: g- V" r我看到有文章报道巢式PCR假阳性很高,可以分享一下你们的protocol吗?

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10
发表于 2011-8-8 14:27 |只看该作者
回复 wwwert 的帖子) {: q; W5 W5 P/ a/ v

! u" y0 f$ d: v* E% f" S* e能分享一下你们实验室的protocol吗?
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