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回复 iamxuchen 的帖子$ J1 T3 y9 {2 u3 j" T
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我不太清楚你用的是哪个公司的试剂盒,有一些试剂盒是需要过夜染色的。1 O* _; Q# V4 c, W' M' G
传代时是否消化成单个细胞这一说法有很多人都不一致,这主要看你们一直用什么方法培养,说消化成单个细胞是因为mES可以支持消化成单细胞的传代方法。) s) J/ F& i; q, J: n
Feeder的密度不要太大,太大了不利于ES的生长。' |9 W. y, V( R6 t
而且ES传代时机要把握好,不要等ES长的太大了在传代,这样容易引起分化。
+ t- r; W1 K O, p E4 iAP染色的原理是:细胞胞浆中的碱性磷酸酶在pH9.0-9.8缓冲液中,能水解磷酸萘酚钠产生α萘酚,后者与一种稳定的偶氮盐偶联染液,沉着与细胞浆中。 {& a5 N$ Q( ^# O9 Y9 l) M0 j
染色的时候着色细胞集中在一边有两种可能性:1、这些细胞没有洗干净2、克隆中仅有一部分细胞分化了,其余的细胞还没有分化,所以呈AP阳性 |
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