有诱导过EMT的经验人士吗？能不能讨论一下，

一路顺风

回复 markllq 的帖子; L  m7 k( W. i+ ~

" K# v+ X) P$ A! F再请假您一下，能不能把细胞铺的很稀，诱导7天，中间不传代，只是补液体呢？
6 R' k, N6 e' j2 q. a非常感谢您！

markllq

回复 一路顺风 的帖子% f5 r% B' l4 S

" X" N7 P1 h; t6 J( r" h3 i; r; \这些你去查weinberg的paper吧，里面写的很清楚。你铺的再稀，细胞是聚团生长的，只要聚团了就对EMT不利，传代是必须的。

一路顺风

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$ O3 S9 K/ Y: A- @: u+ F9 D5 _, b/ Z* ]4 \
明白了，谢谢您。感谢您的答复

一路顺风

回复 markllq 的帖子8 j& Y% Z7 ?* h/ ?" q8 P9 ?  Z  [
! U, x5 O* a9 H$ d
您好！我尝试了诱导时，用MEGM加0.5%FBS的培基，加TGFb1，发现没有诱导组细胞形态也发生了变化。能请教您一下：您用的诱导培基是什么吗？非常感谢您！

markllq

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9 Q* a% W+ w) N# I$ t/ M( y. G" B' k' Z7 u( x
我们用的是5%的血清，血清里面本来就含有tgfb，所以可能会发生EMT，没有关系，这很正常。weinberg实验室是通过磁珠将EMT的细胞去掉。没有磁珠也可以通过消化时mesenchymal和epithelial消化的时间不同去掉mesenchymal。

一路顺风

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/ c& }9 j4 }) G! z  _6 l* N) K( n7 F" [6 s  i
那请问一下，是上皮细胞消化时间短，间叶细胞消化时间长是吗？那您用的是MEGM加FBS吗？
" j. t% n, Y0 Q% O( P1 }9 V谢谢您！
, {# h0 ^  w- k# \2 M$ K还有我在帖子里看到您有MEGM配方，能发给我一下吗？非常感谢！我的邮箱：281375927@qq.com
, J$ X* C' h2 e2 F+ y再次感谢您！

markllq

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: Y! K3 i" R" T( c0 R) m
. @1 o8 Q& n& I* M6 Y2 b# Y& a, H, p当然是上皮更难消化啊，因为表达E-cadherin等黏附蛋白。细胞培养基配方见附件，我们是自己配的培养基。

一路顺风

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8 w0 R# ?2 L$ q' ^* b
* G/ Q1 f8 |) m& K0 K5 u! V' n4 ~' D谢谢您！这样配培养基好省啊，不错！" {. m( Q- c0 M: S4 L' r
请教您：您诱导的时候是用什么培基加5%FBS啊？; ~# e1 ^2 \5 `) N/ u/ y! Y* Y6 ?
谢谢了！