有诱导过EMT的经验人士吗？能不能讨论一下，

一路顺风

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) H4 O% y1 c) X- i再请假您一下，能不能把细胞铺的很稀，诱导7天，中间不传代，只是补液体呢？
( A3 c1 R/ j# a非常感谢您！

markllq

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, o3 H5 x5 w7 ~& M8 K# D2 Q6 M( K  b这些你去查weinberg的paper吧，里面写的很清楚。你铺的再稀，细胞是聚团生长的，只要聚团了就对EMT不利，传代是必须的。

一路顺风

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6 ]/ w( f; i3 |4 ]: ^/ w4 u) _$ H5 F. ?" Z! l# p' c
明白了，谢谢您。感谢您的答复

一路顺风

回复 markllq 的帖子. D" C" Q! u1 f) `# L- f, t
7 d) O( s! i: S/ B4 T0 ~
您好！我尝试了诱导时，用MEGM加0.5%FBS的培基，加TGFb1，发现没有诱导组细胞形态也发生了变化。能请教您一下：您用的诱导培基是什么吗？非常感谢您！

markllq

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" c5 Y" m2 A' {7 M+ d0 @( v我们用的是5%的血清，血清里面本来就含有tgfb，所以可能会发生EMT，没有关系，这很正常。weinberg实验室是通过磁珠将EMT的细胞去掉。没有磁珠也可以通过消化时mesenchymal和epithelial消化的时间不同去掉mesenchymal。

一路顺风

回复 markllq 的帖子7 v; t1 H0 R: j& M! Y# [
2 B/ r. D* O* S9 ?7 f
那请问一下，是上皮细胞消化时间短，间叶细胞消化时间长是吗？那您用的是MEGM加FBS吗？
+ r0 p0 U! x8 ^& p谢谢您！. j. f# A' p, i6 B" m8 c
还有我在帖子里看到您有MEGM配方，能发给我一下吗？非常感谢！我的邮箱：281375927@qq.com
& V" e. S; D  d/ G& J再次感谢您！

markllq

回复 一路顺风 的帖子! S! h# y( @6 ~+ @

1 I  h( a1 ^9 I3 X0 r当然是上皮更难消化啊，因为表达E-cadherin等黏附蛋白。细胞培养基配方见附件，我们是自己配的培养基。

一路顺风

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" [# `# S$ m6 j9 M& A谢谢您！这样配培养基好省啊，不错！) c- k! t$ m: H' Q& U, Y6 e
请教您：您诱导的时候是用什么培基加5%FBS啊？
  Q; q% \& |! X3 O$ B谢谢了！