求助：牛与绵羊克隆过程中的融合问题

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    本人接触克隆时间不长，动物体细胞克隆过程中，卵母细胞的去核、注核及二者的电融合是整个克隆过程的关键操作，这些操作的熟练程度直接影响克隆效率。
" E' E* A7 z* I9 h1 D! x4 v    经过本人多次实验操作练习，我觉得电融合这步操作是最影响效率的。平均下来，能够成功融合成胚胎的比例大约为20%-30%，约10%在电容和之后不久发生胞质萎缩死亡，剩下的大部分卵母细胞与体细胞的复合物不融合（即使相互接触的很好）。我在文献上又看到融合率能达到79%-80%的，在这里想问问各位老师我的融合率低的原因，我的实验的具体参数如下：! T+ Q; u8 [& i, p; V; ?
    融合仪：BTX
* B$ I: K; S. q8 Z    融合参数：1.2kv/cm   30μs/次  连续2次脉冲1 T( t& ?7 {* u! o$ g: D
    融合液成份：甘露醇         0.27mM
, a! _7 ]/ Y0 Q" W1 f/ x                       CaCl2          0.1mM, b+ c. B6 s2 S9 B- u. X1 Y& d6 \9 }+ r
                       MgCl2         0.1mM
. H% h: u3 t; e: K9 h                       Hepes         0.5mM$ I& ?' C& b0 U* i9 }( [
                       PVA            0.01%. j- t: \2 z7 o/ g- _2 `

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