第一次分MEF，感觉细胞好杂啊

jun8013

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1 O, N$ ]: T7 B) H+ }) B1 D1 j# j' g, T
您意思是热灭活？买的进口的，应该还是要热灭活一下，说的有道理！下次灭活下看看

zhusealin

有组织块也不要紧，随着后面传代会逐渐消失的。MEF需要密一点生长

huangcong1988

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5 k- C$ R$ y, Y5 W9 a2 K
5 W# k4 c  e: W4 d1 L6 D, l你是说消化传代还是说分离细胞的时候？传代的话，5min太长了，消化的话5min就太短了，所以你分的细胞少。浓度都可以的，0.05跟0.25差不多，组织块多就用0.25.少就用0.05，主要是控制用量，还有消化时间，我一般是10ml左右胰酶，20min，一只母鼠

南宫燚岚

* ?+ X) U: K$ r6 H( |  Y7 w1 I+ G5 q
消化下来的细胞完全够用了，所以瓶底那些没掉下来的扔掉就可以了。
& D! u* ^. t9 b% g+ |9 p另外，不要让MEF长得太满，100%已经是上限了，只要90%以上就能传代，如果你发现MEF长得很快的话，那在传代时可以采取1:3以上的比例，然后舍弃一部分呗。
; r4 C6 a# h3 x* E! b! L1 W这是我分MEF时的图片：（不知为什么你们的都是紫色的？是CCD的关系么？）* g! E& F2 S% G0 \8 s% g# u' p

* T% \' {7 U' e+ E" w, N分完第一天，因为是体视镜分离，去头尾四肢，所以细胞数比较少7 E- P9 O2 f# i* @7 m: [

2012-11-14 08:56 上传

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$ D" b5 r  t4 M6 D( ]( q- [3 y- W9 \, T, v
第二天就长起来了! k' O5 ]8 S4 S$ X2 F! B

2012-11-14 08:56 上传

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8 @! M0 w. @9 r3 ~9 ^* W

3 u: P! z0 _$ l第三天就该传代了9 ]& M1 t4 [( k. P2 y

2012-11-14 08:58 上传

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原代第三天，需要传代了

1 Y# T7 U$ p- F
5 Y7 y& P) R' P4 x) s3 x( g0 {( c& H
两代过后，细胞纯度有所改善" Q9 H  v  H! N! S3 Z% t, w

2012-11-14 08:58 上传

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传代两次后

labghost

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- Q3 d. t* S! r1 S2 L) v
; l- m( f/ N- I不是，感觉是培养皿是脏的还是怎么的，觉得你这成纤维细胞状态不对啊。