每10ml血你能提多少PBMC

easternliu

我一般40ml血提1.5-3.7*10^7的PBMC，听说别人每10ml能提1*10^7，大家一般能提多少哇

fengxiwu

回复 easternliu 的帖子4 v9 P( m; h1 K/ Q* Y3 h

: p' q# X+ e6 m. d9 |     我做的是白血病实验，需要分离骨髓单个核细胞（BMNC)，梯度离心进行了不下20次。* S& ^  w* b' T
    非白血病人的骨髓1-2ml分离的BMNC不超过10*7，而白血病人的骨髓1-2ml最多可以分离10*8到10*9 BMNC，治疗后的分离细胞数量同非白血病人样本.: y$ o% m$ m2 @* L
      外周血的梯度离心也做过几次，7ml血液大都分离MNC 3-5×10*6左右。（非白血病）  K9 \! x# ~1 u5 h- Q* v
    外周血同骨髓相比MNC密度几乎差一个数量级。5 T: k) Q$ P8 I( m  h
   

meister

一般1*10，6次方/ml

meister

一直很少的话，是分离方法有问题。偶尔少是样本的问题。

easternliu

回复 meister 的帖子
/ O. P7 i. S$ R1 f) n" h/ @: M* u! T6 ~2 w8 D; h
做了不少了，一直没这么大的量分离出来，10^6/ml这个量只有才做过一次脐血时接近。求教，分离哪些不易注意的细节，感激不尽

fengxiwu

回复 easternliu 的帖子  M, Z7 a2 n2 n

' D) o3 [8 _" V. b' V7 v* Q样本可能有个体差异，因为血液中的细胞比例是动态变化的，分离的单个核细胞包括了单核细胞和淋巴细胞，也只能是分离到其中的一部分，回收率不可能达到100%，如果按50%算的话，你看你能分离多少，而且，分离之后的洗涤离心也是会损失一点的。

easternliu

回复 fengxiwu 的帖子
; c" S$ I0 S' S" j# l4 Y$ e
4 f/ I) Z$ n5 V: |! ~做得不多，所以有些细节还不是很清楚

xiaostou

ficoll对细胞数得到多少很关键，选进口的吧

fengxiwu

回复 xiaostou 的帖子
) Q7 @1 ^; K( j( e* n4 B0 S% K1 ~8 N+ N' g" h. P; c. X$ G% m+ c
国产的物美价廉，淋巴细胞分离液没有什么高科技的东西吧，不就是个密度梯度离心吗，为什么一想到的试剂都是国外进口的呢。细胞因子，荧光抗体，国内的如果质量上不去，他怎么提高销量，本来就够便宜的了，如果不提高销售量，哪里来的利润？我们中国人都不支持自己的产品，还奢望他人 的支持吗？要让别人尊重我们，我们自己首先要尊重自己！

meister

$ }+ r; T4 A5 K& V+ ]

7 J. h. S) J6 S0 C5 z6 P8 `回复 fengxiwu 的帖子
7 @( o$ X" B# }0 g! J3 c9 R
6 W. p; s# P2 @, t1 E8 b国产的我试过了， 不稳定，效果比进口的差不少。有时低40-50%