关于间充质干细胞实验技术问题~

tonyww723

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' [( S& x* m0 _7 B) bCO2的变化对细胞生长有影响，但只要孵箱保持5%的浓度就不会有太大问题，如果是传代后发生的，建议还是对培养基和接种密度进行确认。从我的经验来看，估计是传代后的密度计算有问题，如果培养基没什么问题的话，毕竟你传代前细胞长的还不错。如果传代前的细胞状态不好，那估计就是培养基的问题了

liaoyanstudy

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9 X' E# R/ O) j我的培养基一直是用DMEMF12，传代我是从2个50ml传至3个50ml，而且最近颗粒特别多，

liaoyanstudy

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# m$ R/ f7 S/ L! \  N谢谢~

tonyww723

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! Q4 n8 r7 r- f0 t6 f+ r# K$ u5 o. b- ]" k+ d  t$ b0 i) O8 f
加10%血清？ 这个体系一般不会出现太早的老化现象，你按照这个比例传代应该是没问题，可能要考虑一下是否是血清的问题。颗粒？ 细胞内的还是细胞外的？ 细胞外的话，应该是血清的问题。

liaoyanstudy

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, f4 y+ y6 p( O- k) @2 I  R& C! i0 ?& t3 I1 d1 z3 C" H+ O
细胞内和细胞外都有~~血清没有问题~，以前一直用这批血清~
: L. S( z6 a3 ~) B6 I呼呼~

tonyww723

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) I! b& v" m/ s0 L
7 Q- m  W& p7 u& R不知道你原代细胞是否也是这样？ 如果是这种情况，建议重新建立一批原代细胞

李伟

估计是密度不够

shuimochunlan

消化了多久啊？传代密度是多少啊？说得详细点啊，可能就是消化时间过长，损伤大；还有就是接种浓度不够大，传代不够及时

gejianyun

从楼主的照片来看，跟我养出来的差不多。我也是原代养了很久，大概17,8天的样子，细胞形态就呈现这种老化样了。不过之后传代几次，发现细胞的生长速度还是蛮快的，3天就能铺满了。不知楼主后面传代后的生长速度如何？

iloveseven

为什么要用培养瓶养呢，一般原代直接养在皿里吧，细胞不多就养个60的皿就够了。另外，我们这做MSC都是用tryple消化了，没TE那么刺激，也不用担心对细胞的过度伤害！