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楼主: cloud100
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培养脐带干细胞没有成功,恳请各位老师指教,谢谢您!!   [复制链接]

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发表于 2014-7-28 14:16 |只看该作者
给楼主个建议,确认脐带没污染的前提下,尽量不要用抗生素,对于脐带这种急需贴壁和爬出细胞的情况来说,抗生素是会让细胞爬出减慢甚至不生长的
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发表于 2014-7-29 00:43 |只看该作者
回复 snowny007 的帖子& `. E2 W8 V- X: Y% h
; Z  X. A$ A- H+ E- B
啊,这样啊。。。好吧,我试试不用抗生素。谢谢啦~~

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发表于 2014-7-29 19:10 |只看该作者
回复 cloud100 的帖子; d1 P, m/ S1 M0 z- r" ]+ i

, v# i" o6 V) f6 m9 Z' f- t哦,即使是专用的FBS, 也是需要筛选才行的,这样培养效果会比较好,如果普通的可能就是生长会比较缓慢,传代时间间隔长,养干细胞确实蛮费钱的呀
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发表于 2014-7-29 23:09 |只看该作者
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回复 cyagen 的帖子
/ c, Y  A) _5 u6 ^6 d6 z9 A# ~8 f- Z7 n+ ^5 q
嗯,后来才知道这个道理。之前,看文献,大家也大多用的Gibco的FBS,也就买了。。一直不成功,根本没有细胞长出来。
. l. k# z  C0 I% \7 E组织块,有人说小点好,1立方厘米,有人说大点好,我两种都试了,都不成功,考虑是不是要加一点马血清和细胞营养因子...
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发表于 2014-7-29 23:12 |只看该作者
回复 月_幻影 的帖子
# Q& i7 U0 T0 V# {0 H
; B% h- d% v: t! Q  Z6 V我还想问下你哦,关于脐带干细胞组织块的大小,,有人说尽量剪碎,小点好;也有人大块的也成功了,我都糊涂了,不知道到底要多大才合适?芝麻大小、米粒大小?

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发表于 2014-7-30 13:38 |只看该作者
回复 cloud100 的帖子
. I- d5 f4 C7 i7 d/ A' N: n3 c4 f/ S$ M
个人感觉还是剪碎些吧,倒不用剪成芝麻大小,米粒大小就行,大块的组织块也是可以爬出细胞的,个人感觉就是慢一些,再就是选取的位置,尽量撕取华通胶部位,更好培养。其实你多做几次有经验了就知道取什么位置、剪多大块还有什么时候爬出细胞了。。。希望可以帮到你
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发表于 2014-7-30 19:46 |只看该作者
回复 月_幻影 的帖子4 H  \4 i3 T+ X5 ~. N9 Y

$ b) o+ P2 s, n' U, @* t  R嗯,好的,谢谢您。我撕的是羊膜和血管之间的大块组织,应该是华通胶吧。。。

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发表于 2014-7-31 08:53 |只看该作者
回复 cloud100 的帖子" A0 w; z7 b% K+ Q" ]+ W4 x
' ~5 I0 J% Z4 q8 V" M+ G3 s! O
嗯,是的,我们也是使用该部分。
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发表于 2014-8-3 21:47 |只看该作者
回复 cloud100 的帖子
( Y' n/ }! g# I2 b# I2 C, k1 W* Y! j& C2 p
! ]) X8 b1 i0 @( j文献上面不会写明具体用的是哪种血清的,血清批次之间也会有差异,如果有条件还是筛选一下,我们都是剪碎的。
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发表于 2014-8-8 10:38 |只看该作者
回复 frankhu 的帖子3 u4 D, u6 P. U) c

9 D. E) n) j& O) ^8 p同意楼上的,剪成米粒大小,加少量培养液,但我们是第二天补液
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