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楼主: cloud100
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培养脐带干细胞没有成功,恳请各位老师指教,谢谢您!!   [复制链接]

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21楼
发表于 2014-7-28 14:16 |只看该作者
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给楼主个建议,确认脐带没污染的前提下,尽量不要用抗生素,对于脐带这种急需贴壁和爬出细胞的情况来说,抗生素是会让细胞爬出减慢甚至不生长的
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22楼
发表于 2014-7-29 00:43 |只看该作者
回复 snowny007 的帖子4 L' o; [- A. P! i5 @

* I% B3 s' p9 G, h! r0 x啊,这样啊。。。好吧,我试试不用抗生素。谢谢啦~~

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23楼
发表于 2014-7-29 19:10 |只看该作者
回复 cloud100 的帖子
+ P7 M0 @6 l5 x) D8 @
/ {1 C% c" q4 d* J哦,即使是专用的FBS, 也是需要筛选才行的,这样培养效果会比较好,如果普通的可能就是生长会比较缓慢,传代时间间隔长,养干细胞确实蛮费钱的呀
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24楼
发表于 2014-7-29 23:09 |只看该作者
回复 cyagen 的帖子
+ y! t3 Y" S4 A" a/ v1 F" s- L6 o" c- n/ Y, j0 C
嗯,后来才知道这个道理。之前,看文献,大家也大多用的Gibco的FBS,也就买了。。一直不成功,根本没有细胞长出来。
* T0 @0 j  l" @$ A组织块,有人说小点好,1立方厘米,有人说大点好,我两种都试了,都不成功,考虑是不是要加一点马血清和细胞营养因子...
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25楼
发表于 2014-7-29 23:12 |只看该作者
回复 月_幻影 的帖子
5 _) A/ H3 z4 z1 i/ r, x2 e* _1 Q$ G7 G
我还想问下你哦,关于脐带干细胞组织块的大小,,有人说尽量剪碎,小点好;也有人大块的也成功了,我都糊涂了,不知道到底要多大才合适?芝麻大小、米粒大小?

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26楼
发表于 2014-7-30 13:38 |只看该作者
回复 cloud100 的帖子
0 _& f- a9 E" I: ^
! D. l  d) F# {& N2 s$ M. Z/ x个人感觉还是剪碎些吧,倒不用剪成芝麻大小,米粒大小就行,大块的组织块也是可以爬出细胞的,个人感觉就是慢一些,再就是选取的位置,尽量撕取华通胶部位,更好培养。其实你多做几次有经验了就知道取什么位置、剪多大块还有什么时候爬出细胞了。。。希望可以帮到你
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27楼
发表于 2014-7-30 19:46 |只看该作者
回复 月_幻影 的帖子
& @( l4 J* n& H" h0 i2 w0 f+ E+ c
& Y4 b3 Q3 F# J; E$ {嗯,好的,谢谢您。我撕的是羊膜和血管之间的大块组织,应该是华通胶吧。。。

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28楼
发表于 2014-7-31 08:53 |只看该作者
回复 cloud100 的帖子1 Q6 a8 \$ K0 B4 b: R( c
9 w4 J2 j  H$ Y; L5 ~8 B& E2 u: V
嗯,是的,我们也是使用该部分。
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29楼
发表于 2014-8-3 21:47 |只看该作者
回复 cloud100 的帖子8 l- h$ |3 x* W. b2 w6 c, F
3 k& h( G" Y! b
文献上面不会写明具体用的是哪种血清的,血清批次之间也会有差异,如果有条件还是筛选一下,我们都是剪碎的。
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30楼
发表于 2014-8-8 10:38 |只看该作者
回复 frankhu 的帖子
6 T+ l& Z( ^, ]1 ?7 B
' j" w) U! x# i- [+ E同意楼上的,剪成米粒大小,加少量培养液,但我们是第二天补液
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