培养脐带干细胞没有成功，恳请各位老师指教，谢谢您！！

cloud100

回复 yongganyixie 的帖子4 U* W  w& @' E* q. i5 ~) D

7 l* a3 x/ g. D: k5 _( q嗯， 第一次换液是第6天，后面看培养液变金黄色换，大概4-5天的样子，应该不是粘稠的。比较清亮。

lovesxj941

回复 cloud100 的帖子
) C' Q% ?7 g) }# l
% S" {; k' C( ]4 @" l* \恩，酶消化法更好，必须的。

yinff1988

现在大家都用F12吗？不用DMEM/低糖吗？

cloud100

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  y- t1 O+ u! v/ N+ |; G) c* r9 h) P5 n. v' Z! q
我还没有成功，你懂的。不过无论是文献还是论坛里的经验，有人用DMEM/LG成功的，应该影响不大。

baby00000003

时间还早，耐心等~

李敏拉

培养几天后换液时发现有粘稠液体，换液时把它吸走了，然后换上新鲜的培养液，这样可以吗？那粘稠的液体：好像是组织边缘融化于培养基中，也就不可能会贴壁，0 @" b  l5 Q  W$ Q7 {$ l
吸掉可以吗？
3 I7 z6 o8 B8 |4 [! H

fengtingyong

操作应该没有多大问题，你在接种时你的组织块应该加少许的培养液润一润组织块之后倒置，隔夜换液，应该会爬出来了，以后看涨势添加培养液。希望你能成功！

cloud100

回复 fengtingyong 的帖子, W8 J/ u; f/ Q3 g( ^8 y$ `

: U2 X/ ~: h9 A- r1 Q; j哈哈，谢谢呀！后面我成功了，发现关键之一是，要让组织块尽早接触培养基。

cloud100

回复 李敏拉 的帖子) I- K+ [  u! M, n. ~* U4 o
. ?5 `& @% P6 F
呵呵。我后来成功了。
5 C: t# q7 N$ S/ f3 |# F3 f我认为最关键的是，一定要最新鲜的脐带组织。要生下来就立马运输动手实验，越快越好。然后取了华通胶，剪碎，直接放到培养皿上面，超净台里面风机吹2-3分钟，把组织块周围水吹干了，然后立马小心滴加培养液，刚刚保持组织块湿润就OK。
6 f, \/ M) g$ Q. M& Z6 n过24小时小心滴加培养液，浸没培养液，然后就千万别动它了。# |" ~3 J9 J  V. Q
隔着培养箱的玻璃门观察，直到培养液颜色变金黄了，可以半量换液。反正前两周，千万别没事去动它，除非要换液。就这样等到它长出来。