培养脐带干细胞没有成功，恳请各位老师指教，谢谢您！！

听不到

感觉没有什么大问题，我做的和你不一样的应该就是于培养液里剪碎，铺到瓶里之后倒置于培养箱过夜，再正置加少量培养液，然后隔天换液基本就贴壁了，快的10天能长，慢的基本两周也长出来了。不过我之前也整过每天看，然后2周了都没长，舍不得扔，就没动，一直到20天左右的时候看爬出来很多，所以我觉得关键还是静置，别老动它

cloud100

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8 i1 x) d$ n( Q8 f3 e- L恩，好的，谢谢您！！

yongganyixie

我们一般是取回脐带，冲洗干净后，剪成3cm左右的小段，再沿静脉管剪开，剔除静脉，动脉，再撕华通氏胶，再剪碎，洗涤，然后加少量培养液直接贴壁培养，第二天补液，中间再隔几天换液，细胞就慢慢爬出来了

水念人倦

4 x1 w/ J% J) `0 a4 S8 G

+ L, m  M% N5 ~* n手法差不多啊，唯一区别我们用的是αMEM，不过按说区别不大啊，推荐个文章可以看看。

cloud100

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: `! B% R8 e* @' E. o/ U: I( K% y; D0 D! h5 n+ E+ o* v
我就是这么做的，今天已经是第20天了，5个培养瓶都没有细胞，而且感觉培养液颜色变化也越来越慢了，真的不知道哪里有问题，都打算用酶消化法了。。。

cloud100

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7 A$ W6 ^- p" n* X8 l' d2 c% a( F
这篇文献写的是酶消化法哦。。。

水念人倦

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& s$ U6 u6 l' L' p8 E& ]$ u! v. j
* m- l* E& D4 Y是的。劳动力不足，我们正准备尝试。不过有点小贵

lovesxj941

可以试试用培养皿来养。好接种，然后加一点点培养基培养。就是刚沫过培养皿底，但是还没沫过组织块。这样就避免了组织块缺失营养。
5 S: C6 B& Y2 O. ~皿也可以贴多一些。就算漂起来一部分，其他的也能养起来。

cloud100

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嗯，其实我后面做的这一批，的组织块贴壁蛮好的，我也很少移动培养瓶，不过就是没有长出来。组织块有大有小，应该也不存在体积过大或过小问题，实在不明白为什么，打算尝试酶消化法了。

yongganyixie

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你中间换液的时候，倒掉的培养液粘稠吗？我们一般这样养的话，两周左右就出细胞了