求指导NK细胞培养

jianglei_sd

用CD3单抗和IL-2刺激起来的，而且CD3-CD56+只占到20%！这怎么能叫NK细胞呢？/ {" t) z8 X; k" I

9 n7 b7 r: K9 k, ~9 _* D这不是CIK吗？

a52602589

一般2D补液。计数都翻倍。14D后一般扩增300倍。脐血流式40%以上。外周血30%

yangpan521

回复 jianglei_sd 的帖子
5 V" K" v- w) s8 j
1 A: h! m, J+ q还在摸索阶段，请指导

yangpan521

回复 gondobar 的帖子) d4 K# b+ D0 Z7 O
& N$ F: K! k5 M/ Y1 Z& L+ v
请问你是怎么分离的，我还在摸索阶段 ，有很多问题，请指导，谢谢

Hi'Kitty

以前我比较50ml离心管和15ml离心管分单个核细胞的量，结果15ml的离心管分的更多一些，建议可以用15ml的离心管分离试一下。

sonsyoran

我们分离单个核细胞的时候不稀释，因为稀释的时候会将血浆也稀释了。添加的血浆不要超过10%，不然细胞会不爱长。另外你们是有什么特殊原因要定在10天么？我们这是14天

sonsyoran

用饲养细胞那种好像活性会好一些，不过真的是不太可行，本身就属于癌细胞，伦理上过不去吧。怎么跟患者解释这些问题都有，所以我们没采取这种方法。7 }) w) y& ?2 G: c! x: F
我们家是用的日本一家公司的技术，他们提供培养基，然后教给你操作流程。效果还是不错，就是比较贵。所以我也没办法把具体流程透漏给你，希望你见谅啊

alicia_86

回复 单个核细胞 的帖子9 z: E. o2 x- x! }5 H% O0 N
; H8 a* \* `4 y7 W- G
NK的培养瓶，提前孵育效果会更好。

yanglixia1984

回复 wind789 的帖子
  I  W, ?* n0 \+ T/ k, N$ R3 o
, _. n- [  Y7 f+ e6 m那NK细胞怎么样才算是培养成功呢？

yanglixia1984

回复 gondobar 的帖子1 T7 b* F0 |5 x6 L
  `7 w+ d+ h/ C
想问一下NK细胞回输标准是什么