免疫细胞分离的几种方法

shy-shen

表面标记分子法
+ l9 C% a3 D. v8 O' tE-花环沉降法
! k' i! l% ?. v* n5 n0 r1 s人类T细胞表面有SRBC受体绵羊红细胞受体，能够与多个SRBC结合，形状如花环；
' w0 F, q* q  ~& Y5 g$ G亲和淘洗法
  P" {+ A( E2 N8 l" O# G特异性单克隆抗体包被在聚苯乙烯培养皿/板表面，吸附具有相应表面分子的目标细胞，如抗Ig抗体吸附B细胞、抗CD3抗体吸附成熟T细胞，这些都属于正选分离# ~, a* a/ `9 \" Q3 _7 w& l
细胞毒法
+ }& a1 D% F6 q% O* P" F) [1 o补体介导的特异性细胞毒分离法，在抗体的作用下裂解能与抗体结合的细胞，从而分离出不能与此抗体结合的细胞群，属于负选方法
/ g$ Q5 e; @- Z  |0 h  T! {荧光激活细胞分离法
3 m  f5 {6 _* U: C- B; t1 V5 S$ T最有效法，目标细胞经荧光素标记单抗结合后，在激发光照射下会产生荧光，由FASC分选功能分选出来
# s" m) b: S# H1 M- P' H免疫磁珠分离法
; x1 |1 e6 L6 l+ g在磁珠表面包被特异型抗体，与目标细胞表面的抗原结合而与特定细胞粘附，再用磁珠分离, b- I, N  k& O& K3 ?
' r2 O% U) s. Y. @. U+ E# L
对低渗的敏感性7 G% `/ A, b7 V0 X; z
红细胞对低渗的敏感性要高于白细胞，例如红细胞裂解液' v. t( x  w- F2 y3 A, ~
3 Q  p6 I3 {* F9 h: d% m
相对密度差异
7 }$ N" S) x5 d3 Q) u聚蔗糖-泛影葡胺密度梯度离心法即FICOLL
1 P3 @' l2 s) j/ v- F! q红细胞和粒细胞相对密度大于ficoll，沉底；血浆密度最低位于最顶端；分层液位于中间，PBMC位于血浆和分层液的白膜层处) }. i% m8 x6 C" D' w* v* u
PERCOLL密度梯度离心法
4 R& R0 {$ E0 B& }2 n最上层是死细胞残片和血小板，然后是单核细胞层，然后是淋巴细胞层，最后是粒细胞和红细胞. k3 }7 _. ^: L8 @( Y4 G- E$ J

+ v, L, @, s( E2 X9 I2 l黏附和吞噬能力
4 d* f# ^) b6 m6 z- \单核和巨噬细胞具有较强的粘附能力，加入细微的羟基铁颗粒或乳胶颗粒，待单核和巨噬细胞充分吞噬后，用密度梯度离心或者磁场吸附去除，利用尼龙毛柱分离B细胞。* W" l* V; R4 O: P8 y+ `# r

6 i3 ~) L/ J) T特异性促生长因子
6 B( d5 Y2 c- y; o' j0 z5 o. y5 N利用不同种类的免疫细胞需要的生长因子不同进行促进生长