请问体转干的四个转录因子在细胞质中存在吗？

胡鹏飞

请问这四个因子的蛋白在胚胎干细胞的细胞质和细胞核中都存在吗？他们在细胞质和细胞核中是怎么转运的呢？谢谢

anminleiryan

我想，细胞质内是应该存在其前体的；因为蛋白质的翻译必须在细胞质内通过核糖体进行，经过加工后，这些转录因子重新返回细胞核内发挥功能

anminleiryan

回复 2# anminleiryan
  L) u8 ~5 \1 Q! ?/ Z& M& W% j- V/ y
: B3 u! b5 M2 Z: E5 i  `至于他们在细胞质和细胞核中是怎么转运的，你只能通过自己有目的的查资料寻求答案了

军医

学习了

qizhi502

尽然命名为转录因子就是在核中存在了。蛋白合成是在胞质中的

胡鹏飞

谢谢大家！还想问一下，我将原核表达的这四个因子的可溶蛋白导入到细胞质中，核膜附近，可以发挥生物学功能吗？

ghfvcat

回复 6# 胡鹏飞 & n7 @. b- Q& F/ e9 S

6 P9 S8 U! p9 o! d
+ X* e& s% T6 g6 h* ^: E0 g3 d    你是怎么导入的？转录因子入核才能发挥作用，丁盛有做过这种工作，蛋白诱导IPS

msliyv

这文章里好像没有提到用什么方法将蛋白导入细胞的。
% Z1 [" k& D/ A9 G
3 n% L# P3 X: q2 f至于转录因子进核的问题，我倒不觉得是个问题。因为内源的Oct3/4, Sox2, Klf4, c-Myc表达时也是在细胞质中表达然后通过细胞自己的机制导向到核内。所以只要以合适的方法将四种因子的蛋白导入细胞质，有很大的可能这些蛋白会被运送到细胞核。
' Z7 t& Y: M  w6 ?* ^7 Y  @; p. X) E2 ^* a' \8 d
另一个问题是你用原核表达的蛋白有活性吗？你如何鉴定他们的活性？& y1 H, g( I+ e9 U
5 i4 s9 k, {8 j* [# V
回复 7# ghfvcat

ghfvcat

回复 8# msliyv 6 c/ _2 {4 f( n2 Z& V

9 s6 ]& E/ }/ K$ n, B% e
0 ?' C, s7 u) U' ^9 W1 W1 x, O     他用的是polyR融合蛋白，另外还可以用TAT融合，都可以进入细胞核。! c# O* t& Q# [# H
至于有机制导向到核内，我觉得在细胞外合成的蛋白导入细胞后并不一定可以起作用。以为细胞定位是在合成的过程中就决定了的，也许还涉及一些定位序列，而不是在合成成熟的蛋白之后才决定。
9 k( m/ O/ [" P' y  W至于活性，这个问题不太好检测，我也不知道有哪些方法检测蛋白活性，貌似都是从功能上检测的，但这些因子不知道怎么检测，只能是认为可溶状态就是有活性的了。欢迎高人指点。你要有钱的话可以试试做晶体，哈哈5 H, b4 i: P* q3 C7 y
导入蛋白的方法，你可以参见下面这篇文章

胡鹏飞

我先导入的TAT-EGFP融合蛋白，但是细胞核里面没有，都在核膜周围聚集，这是什么原因呢？